Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD32 de Camundongo Conjugado a FITC para Citometria de Fluxo - P08101

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Receptor de Baixa Afinidade da Região Fc de Imunoglobulina Gama II (CD32)

• Codificado pelo gene Fcgr2b, o receptor Fc gama IIB (CD32) é um receptor de baixa afinidade para a região Fc de IgG complexada, existindo como múltiplas isoformas (IIB1, IIB1', IIB2 e uma IIB3 secretada) geradas por splicing alternativo.
• Suas funções principais incluem fagocitose de complexos imunes, modulação da produção de anticorpos por células B e regulação negativa da ativação de células B, células T e mastócitos quando co-engajado com receptores de antígeno.
• A isoforma IIB2 media a endocitose de complexos imunes solúveis via invaginações revestidas por clatrina, enquanto as isoformas IIB1 e IIB1' formam capas mas não internalizam.
• O receptor é amplamente expresso em células de origem hematopoiética, com a IIB1 preferencialmente na linhagem linfoide, a IIB2 na linhagem mieloide e a IIB3 secretada por macrófagos no soro.
• A localização subcelular inclui a membrana celular, compartimentos citoplasmáticos/citoesqueléticos e, para a isoforma IIB3, secreção.
• Características pós-traducionais incluem ligações dissulfeto, glicosilação e fosforilação (fosfoproteína), consistentes com sua arquitetura de domínio de imunoglobulina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde à região extracelular (aa 30–207), sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece o domínio de ligação ao ligante comum às principais isoformas; no entanto, a detecção específica de isoforma deve ser validada no sistema de amostra relevante.
• Para citometria de fluxo, faça titulação do anticorpo conjugado a FITC em uma linhagem celular conhecida por expressar CD32 (por exemplo, esplenócitos de camundongo ou uma linhagem de macrófagos) para determinar a concentração ótima de coloração e minimizar a ligação inespecífica.
• Inclua controles de isotipo apropriados e etapas de bloqueio do receptor Fc para garantir a especificidade ao analisar células hematopoiéticas frescas.
• Considere que o peso molecular observado pode variar (31–36 kDa) dependendo da glicosilação e da isoforma; confirme a detecção por Western blot se validação de aplicação cruzada for necessária.

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