Anticorpo Monoclonal de Coelho para Formil-Histona H2B-K120 (P62807/Q16778) para WB, IHC-P, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Formil-Histona H2B

A Histona H2B é um componente central do nucleossomo, onde envolve e compacta o DNA em cromatina, desempenhando thus um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade dinâmica do DNA é governada pelo "código das histonas", um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (MPTs) nas histonas. Referências relacionadas: UniProt P62807, UniProt Q16778

A Histona H2B humana sofre extensas MPTs, incluindo acetilação (por exemplo, em K6, K12, K16, K21), crotonilação (K12), fosforilação (S15) e formilação em K120. A formilação em K120 é uma modificação emergente que pode influenciar sutilmente a arquitetura da cromatina e a expressão gênica, embora seu significado biológico completo ainda esteja sob investigação ativa. Referências relacionadas: PMID:16283522, PMID:16627869, PMID:21925322, PMID:12757711

Além de seu papel estrutural, a H2B exibe ampla atividade antibacteriana e pode contribuir para a barreira antimicrobiana do epitélio colônico e para a atividade bactericida do líquido amniótico. Referências relacionadas: UniProt P62807, UniProt Q16778

A H2B localiza-se predominantemente no núcleo e se associa aos cromossomos. O genoma humano codifica múltiplas variantes de H2B, incluindo H2B tipo 1-C/E/F/G/I (P62807) e H2B tipo 2-E (Q16778), que compartilham sequências altamente conservadas. O peptídeo imunógeno abrange uma região conservada entre essas isoformas, suportando a ampla reatividade cruzada prevista. Referências relacionadas: UniProt P62807, UniProt Q16778

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à Histona H2B humana com formilação na lisina 120. Espera-se que o anticorpo reconheça especificamente a formil-H2B-K120; considere usar um peptídeo não formilado ou desformilação enzimática como controle negativo para confirmar a especificidade.
• Para Western blotting (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 14 kDa. Use extratos nucleares ou preparações enriquecidas em histonas. Recomenda-se a inclusão de um marcador de baixo peso molecular e uma amostra controle (por exemplo, não tratado vs. tratado com inibidor de formilase).
• Para imunohistoquímica (IHC-P), a recuperação de antígeno pode ser necessária para expor o epítopo nuclear em seções fixadas em formalina e embebidas em parafina. A coloração nuclear deve ser observada; valide com controles de tecido apropriados.
• Para ELISA, revesta o peptídeo formilado e use um peptídeo não modificado como controle para avaliar a especificidade de ligação. Otimize as condições de revestimento e a diluição do anticorpo de acordo com a matriz da amostra.
• Devido à alta identidade de sequência, prevê-se que o anticorpo tenha reatividade cruzada com H2B de humano, camundongo e rato; no entanto, aconselha-se a validação na espécie e no sistema de amostra relevantes.
• Evite agentes de bloqueio não específicos que possam mascarar a modificação de pequenas moléculas; bloqueadores sem BSA ou estratégias de bloqueio alternativas podem ser considerados se houver formação de fundo.

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