GBF1 Rabbit pAb - Q92538

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GBF1

• O GBF1 atua como um fator de troca de nucleotídeos de guanina (GEF) para as GTPases da família Arf, iniciando o revestimento de vesículas ao gerar ARFs ativados através da troca de GDP por GTP. Ele é recrutado para as membranas do cis-Golgi de maneira dependente de Arf-GDP e regulado por ARF1, ARF3, ARF4 e ARF5. Referências relacionadas: PMID:12047556, PMID:12808027, PMID:16926190
• É essencial para o recrutamento do complexo de revestimento COPI para os locais de saída do RE, compartimento intermediário RE-Golgi (ERGIC) e cis-Golgi, e medeia o transporte retrógrado dependente de vesículas COPI desses compartimentos de volta para o RE. Referências relacionadas: PMID:12047556, PMID:12808027, PMID:16926190
• Na rede trans-Golgi, o GBF1 recruta adaptadores GGA1, GGA2, GGA3, BIG1, BIG2 e o complexo AP-1, facilitando o transporte dependente de clatrina; esta função provavelmente requer a atividade GEF em direção a ARF4 e ARF5. Referências relacionadas: PMID:23386609
• É necessário para a montagem do aparelho de Golgi, e sua fosforilação pela AMPK desencadeia a desmontagem do Golgi durante a mitose e o estresse. Referências relacionadas: PMID:12808027, PMID:18003980, PMID:18063581, PMID:23418352
• O GBF1 pode participar do recrutamento dependente de COPI da PNPLA2 para gotículas lipídicas e contribui para a manutenção da morfologia mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:19461073, PMID:22185782, PMID:25190516
• Em neutrófilos, medeia a quimiotaxe estimulada por RGPC e a produção de superóxido ao recrutar e ativar o ARF1 na borda frontal, facilitando a montagem do complexo oxidase de NADPH. Referências relacionadas: PMID:22573891
• O GBF1 é expresso de forma onipresente e está associado à doença de Charcot-Marie-Tooth e à neurodegeneração.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Dado o alto peso molecular do GBF1 (206 kDa), considere o uso de géis de SDS-PAGE com baixa porcentagem (por exemplo, 6-8%) para resolução ideal em Western blotting.
• Valide o anticorpo em linhagens de células humanas e de camundongo relevantes conhecidas por expressar GBF1; a expressão onipresente sugere que a maioria dos tipos celulares é adequada.
• Para imunofluorescência, otimize as condições de fixação e permeabilização para preservar a morfologia do Golgi e permitir o acesso do anticorpo a esta proteína associada à membrana.
• O imunógeno corresponde aos aminoácidos N-terminais 1-85, o que pode fornecer especificidade entre isoformas; verifique no seu sistema experimental.

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