mAb de coelho anti-GCN2 - Q9P2K8

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da GCN2

• A GCN2 (cinase 4 do eIF-2-alfa, também conhecida como proteína semelhante à GCN2) é membro da família de cinases do eIF-2-alfa e atua como um sensor essencial de estresse metabólico.
• Fosforila a subunidade alfa do fator de iniciação da tradução eucariótica 2 (eIF-2-alfa) em resposta à privação de aminoácidos, levando à atenuação global da tradução dependente de cap, ao mesmo tempo que promove a tradução de mRNAs responsivos ao estresse, como o ATF4. Referências relacionadas: PMID:25329545, PMID:32610081
• Atua como ativador da resposta integrada ao estresse (ISR), essencial para a adaptação celular à privação de aminoácidos.
• Modula a progressão do ciclo celular ao reprimir a tradução do mRNA da ciclina D1 após a ativação da resposta a proteínas mal dobradas (UPR) e ao estimular a tradução do mRNA de CDKN1A/p21 durante a escassez de aminoácidos. Referências relacionadas: PMID:26102367
• Localiza-se predominantemente no citoplasma.
• É amplamente expressa nos tecidos, com expressão notável nos pulmões, nas células musculares lisas e nos macrófagos. Referências relacionadas: PMID:10504407, PMID:24292273
• Possui funções antivirais: prejudica a tradução inicial de mRNAs virais durante a infecção por alfavírus (por similaridade) e coordena a imunidade adaptativa mediada por células dendríticas contra o vírus da febre amarela durante a privação de aminoácidos. Referências relacionadas: PMID:24310610
• Está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, e sofre splicing alternativo.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para Western blot (WB), considere o grande tamanho da proteína (~187 kDa); recomenda-se utilizar um gel de SDS-PAGE de baixa porcentagem (por exemplo, 6–8%) e tempos de transferência prolongados.
• Valide o desempenho do anticorpo em lisados de controle positivo de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato conhecidas por expressarem GCN2.
• Para imuno-histoquímica em parafina (IHC-P) e ELISA, otimize a recuperação antigênica e as condições do ensaio para a detecção da GCN2 citoplasmática.
• Como o imunógeno abrange a região N-terminal (aa 1–300), confirme se o anticorpo reconhece a proteína de comprimento total e possíveis isoformas de splicing nas amostras biológicas relevantes.
• Utilize marcadores de peso molecular e controles de carregamento apropriados para a análise de proteínas de alto peso molecular.

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