Anticorpo Policlonal de Coelho GGT1 para WB, IHC-P, ELISA - P19440

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GGT1

• A GGT1 é sintetizada como um proenzima de 61 kDa (UniProt: 61410 Da) que é processado em uma cadeia pesada de 39 kDa e uma cadeia leve de 24 kDa, que se associam para formar a enzima ativa.
• Ela catalisa a clivagem da ligação gama-glutamil da glutationa extracelular (GSH) e dos conjugados de glutationa, liberando glutamato e cisteinilglicina, regulando assim a homeostase da glutationa e o fornecimento de cisteína. Referências relacionadas: PMID:21447318, PMID:27791009
• A GGT1 converte o leucotrieno C4 (LTC4) em LTD4, uma etapa crítica na síntese de leucotrienos cisteinil, que são potentes mediadores pró-inflamatórios. Referências relacionadas: PMID:17924658, PMID:21447318, PMID:7673200
• A enzima também pode catalisar reações de transpeptidação, transferindo o grupo gama-glutamil para dipeptídeos ou aminoácidos para formar novos compostos gama-glutamil. Referências relacionadas: PMID:17924658, PMID:21447318, PMID:7673200
• A GGT1 é uma proteína transmembranar do tipo II ancorada na membrana plasmática por meio de um domínio de âncora de sinal N-terminal, com seu domínio catalítico exposto ao espaço extracelular.
• A proteína é fortemente glicosilada e contém modificações de ácido siálico, que são críticas para seu dobramento correto, estabilidade e função enzimática.
• Ela é altamente expressa no rim e fígado, bem como no pâncreas, estômago, intestino, placenta e pulmão; o uso de promotores alternativos produz isoformas específicas de tecido.
• Uma isoforma específica do pulmão parece ser cataliticamente inativa, sugerindo regulação funcional dependente do tecido.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi gerado contra uma proteína de fusão recombinante correspondente aos aminoácidos 370–569 da GGT1 humana (NP_038265.2), uma região localizada na cadeia leve C-terminal. Este design sugere que o anticorpo pode detectar a cadeia leve de 24 kDa, o proenzima de 61 kDa e possivelmente a cadeia pesada de 39 kDa, dependendo do processamento da amostra e das condições do gel.
• Para western blotting, amostras de controle positivo podem incluir lisados de rim ou fígado humano, que naturalmente expressam altos níveis de GGT1.
• Em aplicações de IHC-P, espera-se coloração da membrana plasmática; as condições de recuperação de antígeno podem precisar de otimização para o seu tipo de tecido e método de fixação.
• Este anticorpo apresenta reatividade cruzada relatada com GGT1 de camundongo e rato, mas os usuários devem validar independentemente a reatividade específica da espécie e as condições do ensaio.
• Devido à natureza multissubunitária da GGT1, considere executar amostras reduzidas e não reduzidas para caracterizar os padrões de bandas.

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