Anticorpo Monoclonal de Coelho Gli3 para WB, IF/ICC, ELISA - P10071

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GLI3

• O GLI3 codifica um fator de transcrição chave da via de sinalização Hedgehog, essencial para o padrão do cérebro, membros e outras estruturas corporais. Referências relacionadas: PMID:10075717 PMID:10375510 PMID:10693759
• A proteína GLI3 de comprimento total (GLI3FL/GLI3-190, ~190 kDa) atua como um ativador transcricional após a ativação do Smoothened (SMO), mas é processada constitutivamente na forma de repressor principal (GLI3R) na ausência de sinalização Hedgehog. Referências relacionadas: PMID:10375510 PMID:10693759
• O GLI3 reconhece especificamente a sequência de consenso de DNA 5'-GACCACCCA-3' para regular diretamente a expressão de genes alvo. Referências relacionadas: PMID:10075717
• A proteína localiza-se dinamicamente ao núcleo, citoplasma e cílio primário, refletindo seu papel na transdução de sinais.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação, metilação e ubiquitinação, que ajustam finamente sua estabilidade e atividade (palavras-chave UniProt: Acetylation, Phosphoprotein, Methylation, Isopeptide bond, Ubl conjugation).
• Mutações no GLI3 estão ligadas a distúrbios do desenvolvimento, como a síndrome de cepalopolissindactilia de Greig (GCPS) e a síndrome de Pallister-Hall (PHS) (UniProt: Variante de doença).
• É amplamente expresso em tecidos adultos, incluindo pulmão, cólon, baço, placenta, testículo e miométrio.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 1301–1580) encontra-se em uma região a jusante dos domínios de dedo de zinco; confirme que o epítopo está presente nas isoformas de comprimento total e processadas ao estudar produtos de clivagem.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de ~170 kDa; eletroforese prolongada e transferência podem ser necessárias devido ao grande tamanho da proteína.
• Valide o anticorpo em seu sistema de amostra (humano, camundongo ou rato) usando controles positivos apropriados (por exemplo, linhagens celulares com expressão conhecida de GLI3 ou ativação da via Hedgehog).
• Em imunofluorescência/ICC, antecipe padrões de coloração nuclear, citoplasmática ou ciliar dependendo do status da sinalização.
• ELISA pode ser usado para detecção quantitativa, mas as condições ideais de revestimento e detecção devem ser determinadas empiricamente.

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