Anticorpo Monoclonal de Coelho para Glutationa Peroxidase 2 para WB e ELISA - P18283

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Glutationa Peroxidase 2

• A Glutationa Peroxidase 2 (GPX2), também conhecida como glutationa peroxidase gastrointestinal, GPx-GI, GSHPx-GI, GPRP-2 e glutationa peroxidase de hidroperóxido de fosfolipídeo, é um membro da família das glutationa peroxidases que atua principalmente na defesa antioxidante celular.
• A GPX2 catalisa a redução dependente de glutationa de hidroperóxidos, incluindo H2O2, hidroperóxido de cumeno, hidroperóxido de terc-butilo e vários hidroperóxidos derivados de ácidos graxos, regulando assim a homeostase redox celular; ela não reduz o hidroperóxido de fosfatidilcolina. Referências relacionadas: PMID:36608588 PMID:8428933
• A proteína se localiza no citoplasma e no citosol, o que é consistente com seu papel na desintoxicação de peróxidos intracelulares.
• Sua expressão é tecido-específica, detectada predominantemente no fígado e no trato gastrointestinal, com ausência no coração e rim, destacando seu papel especializado no equilíbrio redox do sistema digestivo.
• A GPX2 contém um resíduo de selenocisteína (Sec) em seu sítio ativo, que é essencial para sua atividade peroxidásica e é codificado por um códon UGA recodificado.
• Como membro do proteoma de referência com estrutura 3D conhecida, a GPX2 é uma enzima bem caracterizada na pesquisa de estresse oxidativo e inflamação, especialmente em patologias gastrointestinais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região central (aa 70–174) da GPX2 humana, que evita domínios transmembrana previstos ou fortemente modificados; considere verificar a especificidade do anticorpo usando lisados de células que superexpressam GPX2 ou com knockdown de siRNA em uma linhagem celular gastrointestinal relevante.
• Para Western blot, recomenda-se o uso de SDS-PAGE redutor; o tamanho esperado da banda é de aproximadamente 22 kDa, mas pode sofrer uma leve alteração dependendo de modificações pós-tradução ou da preparação da amostra.
• Para ELISA, pareie este anticorpo com um anticorpo de detecção compatível que reconheça um epítopo não sobreposto; valide o ensaio sanduíche usando GPX2 humana recombinante ou extratos de tecido nativo.
• Como a expressão de GPX2 é alta no fígado e no intestino, use HepG2, Caco-2 ou homogenatos de tecido como controles positivos; lisados de coração ou rim podem ser usados como controles negativos.
• Otimize a diluição do anticorpo primário empiricamente, começando de 1:500 a 1:2000 para WB e 0,5-2 µg/mL para ELISA, e inclua reagentes de detecção secundários apropriados.
• Reatividade cruzada com outras glutationa peroxidases (por exemplo, GPX1, GPX3) não foi relatada, mas confirme a especificidade no seu ensaio testando membros recombinantes da família, se disponíveis.

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