Anticorpo Monoclonal de Coelho GRB2 para WB - P62993

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GRB2

• O GRB2 é uma proteína adaptadora não enzimática que serve como um elo crítico em cascatas de sinalização de receptores da superfície celular para respostas celulares a jusante, incluindo expressão gênica e vários processos biológicos, como imunidade inata e adaptativa, autofagia, reparo de DNA e necroptose. Referências relacionadas: PMID:11016927, PMID:11726515, PMID:37626338
• Em células T, o GRB2 liga-se ao LAT fosforilado após o engajamento do TCR, recrutando o SOS1 para ativar a via KRAS/RAF1/MAPK, regulando assim a ativação, diferenciação e função das células T. Referências relacionadas: PMID:9489702, PMID:12171928, PMID:25870599, PMID:36864087
• Da mesma forma, em células B, o GRB2 amplifica a mobilização de Ca2+ e a ativação da quinase MAP ERK após o recrutamento para o BCR fosforilado. Referências relacionadas: PMID:25413232, PMID:29523808
• O GRB2 regula a comutação entre autofagia e necrose programada através da interação com componentes do necrossomo (por exemplo, RIPK1) e reguladores da autofagia (por exemplo, SQSTM1, BECN1). Referências relacionadas: PMID:35831301, PMID:38182563
• Modula a biogênese de miRNA através da formação de um complexo ternário com com AGO2 e DICER1. Referências relacionadas: PMID:37328606
• O GRB2 participa na resposta ao estresse de replicação e no reparo direcionado por homologia (HDR) estabilizando o RAD51 em garfos estagnados e regulando o recrutamento do MRE11. Referências relacionadas: PMID:34348893, PMID:38459011
• Uma isoforma naturalmente ocorrente (Grb3-3) carece da função da domínio SH2 e atua como um negativo dominante, inibindo a sinalização RAS-ERK e a proliferação celular competindo com o GRB2 pela ligação ao SOS1. Referências relacionadas: PMID:36171279
• O GRB2 localiza-se principalmente no citoplasma, mas também é encontrado no núcleo, endossomos e aparelho de Golgi, consistente com seus papéis no tráfego de sinalização.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação e ubiquitinação (ligação isopeptídica), e abriga domínios SH2 e SH3 que medeiam interações com proteínas contendo fosfotirosina e motivos ricos em prolina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o domínio SH3 terminal C e a região adjacente, o que pode reconhecer o GRB2 de comprimento total e suas isoformas; verifique a reatividade no seu sistema modelo.
• Para Western blot, o GRB2 tipicamente migra em ~25 kDa; use controles de carregamento apropriados e valide a especificidade da banda em amostras de knockdown ou knockout.
• Na imunoprecipitação, considere usar um protocolo de reticulação ou um anticorpo secundário específico para a cadeia leve para evitar interferência da cadeia leve de IgG de ~25 kDa.
• Para imuno-histoquímica e imunofluorescência, recomenda-se a otimização da recuperação de antígeno e etapas de bloqueio para cada tipo de tecido.
• A reatividade cruzada do anticorpo com GRB2 de camundongo e rato permite estudos entre espécies, mas confirme com controles positivos e negativos específicos da espécie.

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