HDAC8 mAb de Coelho para IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9BY41

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HDAC8

• Histona desacetilase 8 (HDAC8), também conhecida como HDACL1, é um membro da família de histonas desacetilases de classe I que catalisa a remoção de grupos acetil dos resíduos de lisina nas caixas N‑terminais das histonas centrais (H2A, H2B, H3, H4), levando à compactação da cromatina e à repressão transcricional. Esta atividade é central para a regulação epigenética da expressão gênica, progressão do ciclo celular e processos de desenvolvimento. Referências relacionadas: PMID:10748112 • PMID:10922473 • PMID:10926844
• O HDAC8 funciona dentro de grandes complexos multiproteicos para exercer sua atividade desacetilase e, adicionalmente, desacetila a subunidade SMC3 da coesina, regulando assim a liberação de complexos de coesina da cromatina durante a mitose. Referências relacionadas: PMID:22885700
• Além de sua função desacetilase, o HDAC8 possui atividade decrotonilase de proteínas, catalisando a remoção de grupos crotonil ((2E)-butenoyl) das histonas, expandindo seu papel na modificação epigenética. Referências relacionadas: PMID:28497810
• A proteína pode contribuir para a contratilidade das células musculares lisas, indicando um papel regulador não‑histônico. Referências relacionadas: PMID:15772115
• O HDAC8 localiza-se predominantemente no núcleo e nos cromossomos, mas também pode ser detectado no citoplasma, sugerindo um trânsito subcelular dinâmico.
• A expressão tecidual é difusa, mas em níveis baixos; expressão mais alta é observada no coração, cérebro, rim, pâncreas, fígado, pulmão, placenta e próstata.
• A proteína está sujeita a fosforilação e splicing alternativo, e mutações no HDAC8 estão associadas a doenças, incluindo a síndrome de Cornelia de Lange e deficiência intelectual, destacando sua importância clínica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 1–100 do HDAC8 humano) tem como alvo a região N‑terminal; considere verificar a especificidade do anticorpo por bloqueio de peptídeo ou experimentos de knockdown.
• Para IHC‑P, realize a recuperação de antígeno usando métodos mediados por calor (por exemplo, tampão citrato, pH 6,0) e teste com tecidos conhecidos por expressar HDAC8, como coração ou cérebro.
• Em IF/ICC, certifique-se de uma permeabilização adequada (por exemplo, 0,1% Triton X‑100) e use um contranuclear para confirmar a localização nuclear esperada.
• Para IP, otimize as proporções anticorpo‑lisato e valide os parceiros coimunoprecipitados em sua linhagem celular de interesse.
• O ELISA pode exigir titulação cuidadosa tanto dos anticorpos de captura quanto de detecção; inclua um poço de controle negativo para avaliar o fundo.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é prevista com base na homologia de sequência, mas a validação independente nestas espécies é aconselhável antes de estudos em grande escala.

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