Anticorpo Policlonal de Coelho HEXA para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P06865

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da HEXA

• HEXA codifica a subunidade alfa da beta-hexosaminidase, também conhecida como subunidade alfa da beta-N-acetilhexosaminidase. Ela forma as isoenzimas hexosaminidase A (heterodímero αβ) e S (homodímero αα).
• A enzima hidrolisa a extremidade não redutora da N-acetil-D-hexosamina e da N-acetil-D-hexosamina sulfatada de glicoconjugados, incluindo cadeias de oligossacarídeos, glicolipídios neutros e mucopolissacarídeos.
  Referências relacionadas:
  PMID:11707436
  PMID:16698036
  PMID:8123671
• As isoenzimas S e A são igualmente ativas em glicanos aniônicos bi-sulfatados, trisacarídeo de condroitina-6-sulfato e pentassacarídeo de dermatam sulfato, enquanto a isoenzima B não hidrolisa esses substratos.
  Referências relacionadas:
  PMID:11707436
• Apenas a isoenzima A é responsável pela degradação dos gangliosídeos GM2 na presença da proteína ativadora GM2A.
  Referências relacionadas:
  PMID:8123671
  PMID:8672428
  PMID:9694901
• A proteína está localizada no lisossomo e desempenha papéis críticos no metabolismo de glicoconjugados e lipídios.
• Mutações no gene HEXA levam à doença de Tay-Sachs, uma gangliosidose neurodegenerativa grave caracterizada pelo acúmulo de GM2.
• O splicing alternativo gera múltiplas variantes de transcrição; a proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação e formação de ligações dissulfeto.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 270–529 do HEXA humano, cobrindo uma grande região C-terminal. Este desenho provavelmente reconhece tanto o HEXA de comprimento total quanto possíveis isoformas alternativas; verifique a especificidade no seu sistema de amostra.
• Para Western blot, é esperada uma banda próxima a 61 kDa. Use controles de carga apropriados e considere condições redutoras para resolver complexos ligados por dissulfeto. Lisados de fígado ou cérebro humano podem servir como controles positivos.
• Para IHC-P e IF-P, são sugeridos métodos padrão de fixação com PFA 4% e recuperação antigênica (por exemplo, tampão citrato, pH 6.0). A reatividade cruzada com tecidos de camundongo e rato permite a análise em modelos pré-clínicos.
• Para ELISA, otimize as condições de revestimento usando a proteína HEXA recombinante. Recomenda-se um par combinado com um anticorpo de captura direcionado a um epítopo não sobreposto para o desenvolvimento de ELISA sanduíche.

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