mAb de Coelho contra IgE Humana para WB, FC, ELISA - P01854

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da IgE

• A IgE é uma região constante epsilon da cadeia pesada de imunoglobulina que define o isotipo IgE. Trata-se de uma glicoproteína com pontes dissulfeto intra e intercatenárias.
• A especificidade de ligação ao antígeno da IgE é determinada pelos domínios variáveis gerados pela recombinação V(D)J e hipermutação somática, permitindo o reconhecimento de alta afinidade. Referências relacionadas: PMID:17576170, PMID:20176268
• A IgE secretada medeia respostas alérgicas e antiparasitárias ao se ligar ao receptor de alta afinidade FCER1A em mastócitos, basófilos e eosinófilos, desencadeando a desgranulação e liberação de histamina, leucotrienos e citocinas. Referências relacionadas: PMID:25629393, PMID:33840121, PMID:8114916, PMID:8551243
• A IgE também interage com o receptor de baixa afinidade FCER2 em macrófagos para estimular a eliminação de parasitas e em células B para aumentar a apresentação de antígenos. Referências relacionadas: PMID:7544003, PMID:2167225
• A IgE ligada à membrana existe nas isoformas longa e curta, formando o complexo do receptor de célula B (BCR). A ligação cruzada do BCR pelo antígeno controla a sobrevivência e diferenciação das células B IgE+.
• A expressão de IgE é encontrada predominantemente em linfócitos B após estimulação com IL-4 e CD40, ligando-a às respostas imunes do tipo Th2.
• O splicing alternativo do gene IGHE gera as isoformas secretada e duas isoformas ligadas à membrana, cada uma com propriedades de sinalização distintas.
• Respostas desreguladas de IgE contribuem para condições alérgicas e anafiláticas. Referências relacionadas: PMID:25629393, PMID:33840121, PMID:7544003

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 104-428 da região constante da IgE humana, cobrindo os domínios CH2-CH4. Este design garante o reconhecimento da região Fc compartilhada pelas isoformas secretada e ligada à membrana.
• Para Western blot (WB), recomenda-se o uso de condições redutoras; o peso molecular observado pode ser de ~47 kDa como indicado, mas a glicosilação pode deslocar a banda ou produzir uma mancha.
• Na citometria de fluxo (FC), este anticorpo é adequado para detectar IgE ligada à membrana em células B ou IgE capturada por receptores Fc em basófilos/mastócitos; recomenda-se o uso de controles de isotipo adequados e etapas de bloqueio de Fc.
• Para aplicações em ELISA, este anticorpo monoclonal pode atuar como reagente de captura ou detecção para quantificação total de IgE; otimize a concentração de cobertura e use em par com um anticorpo de detecção anti-IgE policlonal ou monoclonal apropriado.
• Como as concentrações de IgE no soro/plasma são baixas, a preparação da amostra e a sensibilidade do ensaio devem ser verificadas com curvas padrão usando proteína IgE purificada.

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