pAb de coelho IFNAR2 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P48551

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da IFNAR2

• IFNAR2 (interferon alpha/beta receptor 2), também conhecida como IFNABR, IFNARB ou IFN-alpha-REC, codifica a cadeia beta do receptor de interferon tipo I. Múltiplas isoformas são geradas por splicing alternativo; notavelmente, a isoforma 3 é uma forma secretada detectada na urina (PubMed:7759950, PubMed:8181059). O receptor é expresso em células sanguíneas, linhagens de células linfoblastóides e de fibrossarcoma. Referências relacionadas: PMID:7759950 PMID:8181059
• Junto com IFNAR1, a IFNAR2 forma o receptor heterodimérico funcional para interferons tipo I (IFN-α, -β, -ε, -ω, -κ) (PubMed:10049744, PubMed:10556041, PubMed:21854986). A ligação ao ligante aproxima as subunidades, desencadeando a ativação das Janus quinases associadas. Referências relacionadas: PMID:10049744 PMID:10556041 PMID:21854986
• A ativação do receptor induz a transfosforilação de JAK1 (ligado à IFNAR2) e TYK2 (ligado à IFNAR1) (PubMed:10556041, PubMed:11682488, PubMed:12105218). Posteriormente, resíduos específicos de tirosina nos domínios intracelulares de IFNAR1/2 são fosforilados, criando sítios de ancoragem para STAT1 e STAT2 (PubMed:11682488, PubMed:12105218, PubMed:21854986). Referências relacionadas: PMID:10556041 PMID:11682488 PMID:12105218 PMID:21854986
• As proteínas STAT fosforiladas se translocam para o núcleo para modular a transcrição de centenas de genes estimulados por interferon (ISGs), orquestrando respostas antivirais, antiproliferativas e imunomoduladoras (PubMed:12105218, PubMed:28165510, PubMed:9121453). Referências relacionadas: PMID:12105218 PMID:28165510 PMID:9121453
• Além do seu papel na transdução de sinal, a IFNAR2 também pode atuar como um potente inibidor da atividade do receptor de interferon tipo I, provavelmente por meio da ligação competitiva ao ligante ou da regulação da estabilidade do receptor.
• A proteína atravessa a membrana celular e contém domínios extracelulares do tipo fibronectina III; sofre glicosilação e formação de pontes dissulfeto, como evidenciado por análises proteômicas, e está sujeita a fosforilação regulatória.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aa 27-243), portanto, espera-se que o anticorpo almeje a região de ligação ao ligante; é adequado para estudos de bloqueio de receptor ou detecção de receptores solúveis em biofluidos.
• Para Western blotting, é prevista uma banda de ~58 kDa; no entanto, devido à glicosilação N-ligada e ao possível processamento proteolítico, podem ser observadas bandas adicionais ou um peso molecular aparente maior. Valide com controles positivos (por exemplo, células tratadas com IFN) e negativos.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), espera-se a coloração da membrana. Para tecidos ou células que expressam a isoforma secretada, pode ser detectado sinal no citoplasma ou na matriz extracelular; protocolos adequados de fixação e permeabilização devem ser testados.
• Para ELISA, este anticorpo policlonal pode ser usado como reagente de detecção quando pareado com um anticorpo monoclonal de captura adequado; a reatividade cruzada com a IFNAR2 de camundongo e rato deve ser verificada na matriz do ensaio.
• Como anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser monitorada, e experimentos de titulação são recomendados para novas aplicações.

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