Anticorpo Monoclonal de Coelho IKKα para WB, ELISA - O15111

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de IKKα (CHUK)

• IKKα (CHUK) é uma serina/treonina-proteína quinase que atua como subunidade catalítica do complexo IKK, desempenhando um papel central na via de sinalização canônica do NF-kappa-B ao fosforilar os inibidores IκB, desencadeando sua ubiquitinação e degradação proteassomal.
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• Também participa da via não canônica do NF-kappa-B, onde o homodímero IKKα ativado por MAP3K14 fosforila NFKB2/p100, induzindo seu processamento para p52 e a formação de complexos RelB-p52 que regulam a sobrevivência de células B e a organogênese linfoide.
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• IKKα exerce controle de feedback negativo em ambas as vias, canônica e não canônica, do NF-kappa-B: promove a montagem do complexo editor de ubiquitina A20 para limitar a ativação de genes inflamatórios e também fosforila e desestabiliza MAP3K14/NIK.
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• Dentro do núcleo, IKKα fosforila CREBBP, aumentando suas atividades transcricionais e de histona acetiltransferase, e também fosforila a histona H3 em Ser-10, facilitando a subsequente acetilação em Lys-14 por CREBBP para modular a acessibilidade da cromatina em promotores responsivos ao NF-kappa-B.
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• IKKα fosforila FOXO3, potencialmente regulando sua atividade pró-apoptótica.
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• No contexto da mitofagia, IKKα fosforila AMBRA1, promovendo sua interação com proteínas da família ATG8 e estimulando a atividade mitofágica.
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• A proteína é amplamente expressa e se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo, consistente com seus papéis duplos na sinalização e regulação transcricional.

• Modificações pós-traducionais importantes incluem acetilação e conjugação de ubiquitina, e IKKα contém um domínio de ligação a ATP essencial para sua função quinase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1-100 no N-terminal do IKKα humano; esta região provavelmente é conservada no camundongo, apoiando a reatividade cruzada relatada. Valide no sistema de amostra relevante antes de experimentos em larga escala.
• Para Western blot, uma banda esperada em aproximadamente 85kDa deve ser observada. Otimize a diluição do anticorpo e as condições de bloqueio para seus lisados específicos.
• Em aplicações de ELISA, considere usar o peptídeo imunógeno como antígeno de revestimento positivo para confirmar a reatividade do anticorpo e teste a reatividade cruzada com IKKα de camundongo, se necessário.
• Observe que múltiplas isoformas ou formas modificadas pós-traducionalmente podem produzir bandas adicionais; consulte a literatura atual para o sistema de modelo específico.

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