Anticorpo policlonal de coelho contra INPPL1 para WB e ELISA - O15357

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da INPPL1

• Atividade enzimática: a INPPL1 funciona como uma 5-fosfatase de fosfoinositídeos que desfosforila PtdIns(3,4,5)P3 para formar PtdIns(3,4)P2, regulando negativamente a via de sinalização PI3K (PubMed:16824732). Referências relacionadas: PMID:16824732
• Sinalização da insulina: desempenha um papel central na modulação da sinalização da insulina ao regular vias dependentes de PI3K, embora os mecanismos moleculares detalhados ainda estejam sob investigação (PubMed:9660833). Referências relacionadas: PMID:9660833
• Dinâmica da actina e migração: a INPPL1 é fundamental para a regulação do citoesqueleto de actina, participando do enrugamento da membrana, adesão celular, espalhamento celular e formação de lamelipódios induzida por HGF (PubMed:11739414, PubMed:12676785, PubMed:15668240, PubMed:21624956, PubMed:12235291, PubMed:15735664). Referências relacionadas: PMID:11739414, PMID:12676785, PMID:15668240, PMID:21624956, PMID:12235291, PMID:15735664
• Sinalização de EGFR e EGF: regula a internalização e a degradação do EGFR e participa da sinalização mediada por EGF ao modular negativamente a via PI3K-PKB (PubMed:15668240, PubMed:11349134). Referências relacionadas: PMID:15668240, PMID:11349134
• Função das células imunes: a INPPL1 atua como regulador negativo de FCGR2A e medeia a sinalização inibitória de FCGR2B, destacando seu papel no término da transdução de sinais em células imunes (PubMed:12690104, PubMed:11016922). Referências relacionadas: PMID:12690104, PMID:11016922
• Localização subcelular: a proteína é encontrada no citoplasma, no citoesqueleto, nas projeções celulares (filopódios, lamelipódios), na membrana celular basal, no núcleo e nos polos do fuso, em consonância com seus papéis na remodelação do citoesqueleto e na regulação do ciclo celular.
• Especificidade tecidual: a INPPL1 é amplamente expressa, com níveis mais elevados no músculo esquelético, coração e cérebro; também está presente em plaquetas e macrófagos.
• Funções adicionais: participa da ossificação endocondral (PubMed:23273569) e está envolvida na orientação do fuso mitótico, ciliogênese e homeostase do ciclo celular (por similaridade). Referências relacionadas: PMID:23273569

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Desenho do imunógeno: o anticorpo foi produzido contra um fragmento recombinante que abrange os aminoácidos 100-310 da INPPL1 humana (NP_001558.3). Essa região está localizada no domínio N-terminal e pode conferir reatividade com regiões estruturalmente conservadas nos ortólogos de camundongo e rato.
• Western blot: espera-se uma banda de aproximadamente 139 kDa; considere usar um controle positivo, como lisado de células inteiras HeLa ou MCF7, e valide a detecção na espécie de interesse.
• ELISA: o anticorpo pode ser usado em ELISA direto contra o imunógeno; para aplicações de ELISA sanduíche, a combinação adequada com um anticorpo de detecção deve ser validada empiricamente.
• Geral: como se trata de um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada em ensaios críticos; recomenda-se otimizar os fatores de diluição.

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