Anticorpo policlonal coelho JAK2 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60674

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da JAK2

• JAK2 (Janus quinase 2) é uma tirosina-proteína quinase não receptora que desempenha um papel central na sinalização de citocinas e fatores de crescimento. Fosforila receptores de citocinas tipo I (ex.: GHR, PRLR, EPOR, MPL) e receptores tipo II (ex.: receptores de IFN, receptores de interleucina), iniciando cascatas a jusante (PubMed:15690087, PubMed:15899890, PubMed:7615558). Referências relacionadas: PMID:15690087 PMID:15899890 PMID:7615558
• Após ativação do receptor, a JAK2 fosforila proteínas STAT, levando à sua dimerização, translocação nuclear e ativação da transcrição gênica. Este mecanismo é crítico para processos como a eritropoiese, onde a ativação da JAK2 induzida por EPO recruta e fosforila a STAT5, que então regula positivamente genes relacionados à eritropoiese (PubMed:9618263, PubMed:9657743). Referências relacionadas: PMID:9618263 PMID:9657743
• Além da sinalização citoplasmática, a JAK2 funciona no núcleo fosforilando a histona H3 na tirosina 41 (H3Y41ph). Esta modificação exclui a proteína da heterocromatina CBX5 (HP1α) da cromatina, destacando um papel direto na regulação da cromatina e no controle epigenético (PubMed:19783980). Referências relacionadas: PMID:19783980
• A JAK2 está implicada em diversas vias de sinalização, incluindo a fosforilação da ARHGEF1 induzida por angiotensina II, a fosforilação da CDKN1B para regular o ciclo celular e a fosforilação recíproca com a TEC para ativar a transcrição do FOS. Também modula a atividade do canal de potássio KCNA3 e participa na sinalização do receptor CNTF/OSM (PubMed:20098430, PubMed:21423214, PubMed:25644777, PubMed:11294841, PubMed:9188471). Referências relacionadas: PMID:20098430 PMID:21423214 PMID:25644777 PMID:11294841 PMID:9188471
• Subcellularmente, a JAK2 é encontrada no sistema endomembranar, citoplasma e núcleo, permitindo seus papéis multifacetados na transdução de sinal, desde eventos próximos à membrana até interações diretas com a cromatina.
• A JAK2 é expressa de forma ubíqua na maioria dos tecidos, consistente com seu papel fundamental na sinalização de citocinas e na regulação hematopoiética. É classificada como um proto-oncogene, com rearranjos cromossômicos e mutações ligados a doenças mieloproliferativas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• A sequência do imunogênio (a.a. 933–1132) reside no domínio quinase da JAK2, que é bem conservado entre humano, rato e rato, apoiando sua reatividade cruzada prevista. No entanto, verifique a reatividade em seu sistema de modelo específico.
• Para Western blotting (WB), a banda prevista é de ~131 kDa. Use controles de carga apropriados e considere o uso de inibidores de fosfatase para preservar os estados de fosforilação.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), a JAK2 pode mostrar localização citoplasmática e nuclear. Inclua tecidos de controle negativo e positivo apropriados (ex.: medula óssea ou baço para expressão hematopoiética).
• O anticorpo é adequado para ELISA; certifique-se de que o antígeno de revestimento ideal e a diluição do anticorpo sejam determinados empiricamente.

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