Ac mAb de Coelho Específico para Ubiquitina de Ligação K48 - P0CG47

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Ubiquitina

• Codificada pelo gene UBB, a poliubiquitina-B é uma proteína precursora que é clivada para gerar múltiplos monómeros de ubiquitina.
• A ubiquitina existe de forma livre ou ligada covalentemente a proteínas alvo através de uma ligação isopeptídica, servindo como um modificador pós-traducional versátil.
• Cadeias de poliubiquitina podem ser formadas através de diferentes ligações de lisina (por exemplo, K6, K11, K29, K33, K48, K63) ou ligações lineares, cada uma ditando destinos celulares distintos.
• Cadeias de poliubiquitina ligadas por K48 direcionam principalmente proteínas para degradação pelo proteassoma 26S, uma via crítica para o controlo de qualidade das proteínas e regulação do ciclo celular.
• Cadeias ligadas por K63 estão envolvidas em processos não proteolíticos, como endocitose, respostas a danos no ADN e ativação do fator de transcrição NF-kappa-B.
• A localização subcelular inclui o citoplasma, núcleo e membrana externa mitocondrial, refletindo os seus diversos papéis funcionais.
• A ubiquitina em si está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e ADP-ribosilação, que podem modular a sua atividade e interações.
• Cadeias de poliubiquitina livres (não ancoradas) também participam na sinalização celular, como a ativação de proteínas quinases, independentemente da sua conjugação a outras proteínas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo sintético desenhado para reconhecer especificamente a topologia da poliubiquitina ligada por K48; considere o uso de controlos específicos de ligação para confirmar a especificidade do anticorpo.
• Para Western blotting (WB), recomenda-se a preparação da amostra em condições desnaturantes e redutoras para detetar conjugados de ubiquitina; valide o desempenho no seu sistema específico de amostras.
• Em imunofluorescência (IF/ICC), os protocolos de fixação e permeabilização adequados devem ser otimizados para preservar os sinais de ubiquitina; inclua controlos negativos para avaliar o fundo.
• Para aplicações de ELISA, os antígenos de revestimento devem ser cuidadosamente selecionados para imitar o epítopo de ligação K48; confirme os limites de deteção com padrões conhecidos.
• A reatividade cruzada é reportada apenas para amostras humanas; se trabalhar com outras espécies, verifique a homologia da sequência e realize validações adicionais.

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