[Validado por KD] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Aurora B para WB, IF/ICC, ELISA - Q96GD4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Quinase Aurora B

• A quinase Aurora B (AURKB, também conhecida como AIK2, AIM1, STK12) é uma serina/treonina quinase que serve como subunidade catalítica do complexo passageiro cromossômico (CPC), o qual é essencial para a segregação cromossômica precisa e a citocinese (PubMed:11516652, PubMed:12925766, PubMed:14610074). Referências relacionadas: PMID:11516652 PMID:12925766 PMID:14610074
• Regula eventos mitóticos chave ao fosforilar substratos como BIRC5/survivina, INCENP, histonas H3S10/H3S28 e CENPA, garantindo a ativação do ponto de verificação de montagem do fuso e a attachment cinetocoro-microtúbulo (PubMed:11784863, PubMed:11856369, PubMed:11756469). Referências relacionadas: PMID:11784863 PMID:11856369 PMID:11756469
• A atividade da AURKB é potencializada pela fosforilação da INCENP através de um loop de feedback positivo com a HASPIN nos centrômeros (PubMed:11516652, PubMed:21658950). Referências relacionadas: PMID:11516652 PMID:21658950
• A quinase é um componente crítico do ponto de verificação da citocinese, fosforilando CHMP4C para atrasar a abscisão e prevenir a formação de pontes cromossômicas (PubMed:22422861, PubMed:24814515). Referências relacionadas: PMID:22422861 PMID:24814515
• Durante a mitose, a AURKB localiza-se dinamicamente no núcleo, centrômeros, cinetocoros, microtúbulos do fuso e no corpo intermediário, refletindo seus múltiplos papéis na dinâmica cromossômica e divisão celular.
• É altamente expressa no timo, baço, pulmão, testículo, cólon, placenta e fígado fetal, e sua expresso atinge o pico durante as fases S e G2/M; é frequentemente superexpressa em cânceres, com níveis elevados no fígado metastático em comparação com o fígado normal.
• A AURKB fosforila a histona H3 em Ser10 e Ser28, uma marca da mitose e um marcador comumente usado em estudos do ciclo celular (PubMed:11784863, PubMed:11856369). Referências relacionadas: PMID:11784863 PMID:11856369
• Substratos adicionais incluem KIF2C, RACGAP1, VIM e p53/TP53, ligando a AURKB a diversos processos mitóticos e controle de pontos de verificação (PubMed:20959462). Referências relacionadas: PMID:20959462

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo N-terminal (aminoácidos 1–100) do Aurora B humano; para Western blot, condições desnaturantes podem aumentar a exposição do epítopo. Bandas não específicas podem ser minimizadas otimizando o bloqueio e a diluição do anticorpo.
• Em IF/ICC, o Aurora B exibe localização dinâmica durante a mitose; os protocolos de fixação e permeabilização devem ser validados para preservar a antigenicidade e o acesso aos centrômeros/corpo intermediário.
• Para ELISA, considere usar o anticorpo para captura ou detecção após confirmar a ligação ao Aurora B recombinante ou nativo, com titulação apropriada e poços de controle.
• A validação por KD (knockdown) sugere especificidade; no entanto, confirme a reatividade em seu sistema de amostra usando controles negativos apropriados (por exemplo, knockout).
• Como o anticorpo apresenta reatividade cruzada com camundongo e rato, ele pode ser empregado em linhagens celulares e tecidos de roedores, embora a validação específica da espécie seja recomendada.

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