[KD Validado] Anti-EGFR PolymAb® de Coelho para WB, IF/ICC, ELISA - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EGFR

• EGFR é um receptor tirosina quinase que se liga a ligandos da família EGF e ativa múltiplas cascatas de sinalização downstream, incluindo os módulos RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC, STAT e NF-kappa-B, para converter sinais extracelulares em respostas celulares como proliferação, sobrevivência e migração. Referências relacionadas: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:11116146
• Os ligandos conhecidos do EGFR incluem EGF, TGFA, AREG, epigen, BTC, epiregulina e HBEGF; a ligação do ligando induz a dimerização do receptor e a autofosforilação em resíduos citoplasmáticos chave. Referências relacionadas: PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• O EGFR fosforilado recruta proteínas adaptadoras como GRB2 e fosforila diretamente substratos como RGS16 (ativando sua atividade GTPase) e MUC1 (aumentando a interação com SRC e beta-catenina), ligando-se à sinalização por proteínas G e às vias de adesão celular. Referências relacionadas: PMID:11602604, PMID:11483589
• A isoforma 2 pode atuar como antagonista da ação do EGF e é notavelmente expressa em cânceres de ovário.
• O EGFR localiza-se predominantemente na membrana celular, mas também no retículo endoplasmático, aparelho de Golgi, membrana nuclear, endossomos e pode ser secretado.
• É expresso de forma ubíqua nos tecidos e também funciona como receptor hospedeiro para a entrada do vírus da hepatite C (HCV), mediando a formação do complexo CD81-CLDN1.
• O EGFR está envolvido na potenciação de longo prazo e na hipersensibilidade à dor (por similaridade), e sua desregulação está associada a diversos tipos de câncer.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é a proteína EGFR recombinante humana; os usuários devem validar a reatividade no seu sistema de amostra específico (por exemplo, linhas celulares com expressão conhecida de EGFR, como a A431).
• Para Western blotting, podem ser observadas múltiplas bandas correspondentes ao EGFR de comprimento total (~134 kDa) e fragmentos proteolíticos (por exemplo, 44, 69, 77 kDa); estes são consistentes com o processamento relatado do EGFR.
• Em imunofluorescência/ICC, é esperada coloração da membrana plasmática e endossomos; a permeabilização pode ser necessária para detectar as pools intracelulares.
• Este anticorpo é um monoclonal recombinante de coelho (PolymAb®) que oferece alta consistência entre lotes, adequado para aplicações quantitativas em ELISA.
• Como com qualquer anticorpo, as concentrações e condições de trabalho ideais devem ser determinadas experimentalmente pelo usuário final.

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