[KD Validado] Anticorpo Policlonal Anti-FGFR3 para WB, FC, ELISA - P22607

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FGFR3

• O receptor 3 do fator de crescimento de fibroblastos (FGFR3), também designado CD333, JTK4 e ACH, é um membro da superfamília das imunoglobulinas de receptores tirosina quinase. Múltiplos isoformas são gerados por splicing alternativo, incluindo uma isoforma secretada (isoforma 3) que mantém a capacidade de ligação ao ligante.
• O FGFR3 é um receptor de superfície celular que se liga a fatores de crescimento de fibroblastos, desencadeando cascatas de sinalização intracelular que regulam a proliferação, diferenciação e apoptose celular. É essencial para a diferenciação normal dos condrócitos e desenvolvimento esquelético, e também modula a osteogênese e a mineralização óssea pós-natal.
• A ligação do ligante ativa vias-chave: a fosforilação da PLCG1 produz segundos mensageiros; a fosforilação da FRS2 recruta GRB2/SOS1 levando à ativação de RAS-MAPK (ERK1/2), e também envolve a via de sinalização da AKT1. Essas cascatas medeiam diversos resultados celulares, incluindo apoptose em condrócitos e proliferação em células cancerígenas.
• O FGFR3 está localizado principalmente na membrana plasmática, mas também é encontrado em vesículas citoplasmáticas e no retículo endoplasmático. A isoforma secretada 3 pode interferir na sinalização do FGF ligando-se aos ligantes extracelularmente.
• A expressão tecidual inclui cérebro, rim, testículo e tecidos fetais como pulmão, intestino delgado e rim. A isoforma 2 é detectada em células epiteliais, enquanto a isoforma 1 é encontrada em células fibroblásticas.
• A desregulação do FGFR3, frequentemente devido a mutações ativadoras, está implicada em displasias esqueléticas (por exemplo, acondroplasia, displasia tanatofórica), craniossinostose e múltiplos cânceres. O FGFR3 constitutivamente ativo promove a sinalização de STAT1, STAT5 e PTPN11/SHP2, contribuindo para a oncogênese.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região extracelular (aminoácidos 23–375), que está presente em todas as isoformas ligadas à membrana e secretadas. Verifique a detecção das isoformas desejadas na sua matriz de amostra consultando a literatura e usando controles específicos para isoformas.
• No Western blot, espere múltiplas bandas entre 75 e 88 kDa devido à glicosilação diferencial e expressão de isoformas. Otimize os controles de carga e considere o uso de enzimas de desglicosilação para confirmar a especificidade.
• Para citometria de fluxo, use células não permeabilizadas para direcionar o FGFR3 de superfície. Inclua um controle de isotipo relevante e valide com linhagens celulares que superexpressem FGFR3 ou com knockdown por siRNA.
• No ELISA, a isoforma secretada 3 pode competir pelos anticorpos de captura ou detecção. Pré-limpe os sobrenadantes de cultura ou use pares de anticorpos monoclonais/policlonais projetados contra epítopos não sobrepostos.

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