[Validado por KD] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-GALC para WB, IHC-P, ELISA - P54803

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GALC

• A GALC hidrolisa as ligações de éster de galactose de glicolipídios, incluindo galactosilceramida e galactosilesfingosina, e medeia o catabolismo lisossomal da galactosilceramida, um lipídeo importante na mielina, rim e epitélios. Referências relacionadas: PMID:8281145, PMID:8399327
• A proteína pertence à família das glicosil hidrolases 59 e é altamente conservada entre humanos, camundongos e ratos.
• O splicing alternativo de transcritos de GALC produz múltiplas isoformas, que podem ter papéis regulatórios ou funcionais distintos.
• A nível subcelular, a GALC localiza-se no lisossomo, consistente com sua atividade de hidrolase ácida.
• A GALC é expressa em vários tecidos, com níveis detectáveis em testículo, cérebro, placenta, urina, rim e fígado.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada e formação de pontes dissulfeto, que são críticas para o dobramento e estabilidade da enzima.
• Mutações de perda de função na GALC levam à doença de Krabbe (leucodistrofia de células globoides), caracterizada por desmielinização grave e neurodegeneração.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, uma diluição inicial de 1:500–1:2.000 é frequentemente adequada para detectar a banda da GALC de ~77 kDa em lisados celulares ou de tecidos. Valide em amostras relevantes como cérebro, testículo ou rim.
• Em imuno-histoquímica (parafina), a recuperação de antígeno usando tampão citrato (pH 6,0) pode melhorar a coloração. Considere o uso de tecidos de controle positivo como cérebro ou placenta.
• Aplicações de ELISA podem empregar o anticorpo como reagente de captura ou detecção; o emparelhamento ideal e as concentrações devem ser determinados usando GALC recombinante ou amostras biológicas calibradas.
• O anticorpo reconhece a GALC humana, de camundongo e de rato, tornando-o útil para estudos comparativos entre espécies.
• Como um mAb validado por knockdown, ele pode fornecer especificidade de alvo confiável em ensaios de Western blot; os usuários devem confirmar a eficiência do knockdown em seu próprio sistema experimental.
• Armazenamento e manuseio: alíquota e armazene a -20°C para estabilidade a longo prazo; evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.

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