[Validado por KD] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-ISG15 para WB, ELISA - P05161

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ISG15

• ISG15 (gene estimulado por interferon 15) é uma proteína semelhante à ubiquitina de 15-17 kDa, também conhecida como G1P2, IP17 e hUCRP, codificada pelo gene ISG15 no cromossomo 1 humano.
• Desempenha um papel crítico na imunidade antiviral inata ao se conjugar a resíduos de lisina de proteínas alvo (ISGulação), um processo que envolve enzimas E1, E2 e E3. Referências relacionadas: PMID:27564865 PMID:39465252 PMID:33727702
• A ISGulação promove a oligomerização do sensor viral IFIH1/MDA5, ativando a imunidade inata contra coronavírus, flavivírus e picornavírus. Referências relacionadas: PMID:33727702
• O ISG15 livre, não conjugado, é secretado e atua como uma citocina, induzindo a produção de IFN-γ e a proliferação de células NK, e servindo como um fator quimiotático para neutrófilos. Referências relacionadas: PMID:29100055
• Subcelularmente, o ISG15 é encontrado no citoplasma e pode ser secretado para o espaço extracelular.
• Exibe ampla atividade antiviral contra vírus de DNA e RNA, incluindo influenza A, HIV-1 e vírus Ebola, ao perturbar o brotamento e a replicação viral.
• O ISG15 é expresso em células linfoides, músculo estriado e liso, vários epitélios e neurônios. Sua expressão é aumentada em vários cânceres, incluindo adenocarcinoma pancreático e câncer de bexiga.
• Modificações pós-traducionais incluem S-nitrosilação e formação de ligações dissulfeto, e participa na via de conjugação semelhante à ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde ao ISG15 humano de comprimento total (aminoácidos 1-165), sugerindo reconhecimento do anticorpo pela proteína nativa. Confirme a especificidade na sua matriz de amostra.
• Para western blot, a banda esperada está em ~18 kDa em condições redutoras. Use controles positivos apropriados (por exemplo, células tratadas com interferon) para verificar a detecção.
• É relatada reatividade cruzada com ISG15 de camundongo e rato; no entanto, valide a reatividade no seu sistema experimental específico, pois a homologia entre espécies pode afetar a intensidade do sinal.
• Protocolos de ELISA podem exigir otimização do antígeno de revestimento e da concentração de anticorpo. Considere o uso da proteína ISG15 recombinante como padrão.

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