[Validado por KD] Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-LC3B para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q9GZQ8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da LC3B

• A LC3B (MAP1LC3B) é um modificador semelhante à ubiquitina essencial para a formação de vacúolos autofagossômicos durante a macroautofagia.
  Referências relacionadas:
  PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329

• Desempenha um papel crítico na mitofagia ao ligar-se a ceramidas C-18 e ancorar autofagolisossomas às membranas mitocondriais externas para eliminar mitocôndrias danificadas.
  Referências relacionadas:
  PMID:22922758

• A LC3B promove a ciliogênese primária através da remoção dependente de autofagia da OFD1 dos satélites centriolares.
  Referências relacionadas:
  PMID:24089205

• Em situações de estresse nutricional, a LC3B interage com o receptor de reticulofagia TEX264 para remodelar subdomínios do retículo endoplasmático em autofagossomos, promovendo a renovação do RE.
  Referências relacionadas:
  PMID:31006537, PMID:31006538

• A LC3B recruta diretamente a JMY para a membrana do fagóforo, estimulando a nucleação de actina e a biogênese do autofagossomo.
  Referências relacionadas:
  PMID:30420355

• As proteínas LC3 estão principalmente envolvidas no alongamento do fagóforo, enquanto a subfamília GABARAP/GATE-16 atua em um estágio posterior de maturação do autofagossomo.
  Referências relacionadas:
  PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329

• Subcelularmente, a LC3B localiza-se nas membranas do autofagossomo, membranas mitocondriais, vesículas citoplasmáticas e no citoesqueleto.

• Expressão tecidual: mais abundante no coração, cérebro, músculo esquelético e testículo; baixa no fígado.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde à região N-terminal (aa 1–100) da LC3B humana, que está presente tanto nas formas não conjugadas (LC3B-I) quanto lipidadas (LC3B-II). Considere este desenho ao interpretar resultados em diferentes estados autofágicos.
• Para Western blotting, uma diluição inicial de 1:500–1:2000 é frequentemente adequada; no entanto, recomenda-se otimização no seu sistema experimental. Espere observar duas bandas correspondentes a LC3B-I e LC3B-II, com a LC3B-II migrando ligeiramente mais rápido.
• Em imunofluorescência (IF-P) e imuno-histoquímica (IHC-P), inclua controles apropriados (por exemplo, indução de autofagia) e valide a especificidade do sinal com amostras de knockdown ou knockout, se disponíveis.
• Como o anticorpo mostra reatividade cruzada com LC3B de camundongo e rato, confirme a homologia de sequência se estiver usando essas espécies e considere realizar um estudo piloto para avaliar o desempenho em amostras não humanas.

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