[KD Validado] Anticorpo Policlonal Anti-MAD1/MAD1L1 para WB, ELISA - Q9Y6D9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de MAD1/MAD1L1

• MAD1L1 (também conhecido como MAD1, TXBP181) codifica a proteína MAD1 do ponto de verificação do fuso mitótico, um guardião crítico da fidelidade mitótica.
• Forma um complexo heterotetramérico com MAD2L1 fechado (C-MAD2) em cinetócoros não ligados, promovendo a conversão de MAD2L1 aberto (O-MAD2) em C-MAD2 para propagar o sinal de "esperar anáfase". Referências relacionadas: PMID:10049595 PMID:20133940 PMID:29162720
• No carcinoma hepatocelular, o MAD1 pode sequestrar MAD2L1 no citoplasma, prejudicando o ponto de verificação do fuso e contribuindo para a instabilidade cromossómica.
• A proteína localiza-se dinamicamente nos cinetócoros, centrossomas, polos do fuso e no envelope nuclear durante a mitose, e também transita pelo citoplasma.
• O MAD1 está sujeito a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, que regulam as suas funções dependentes do ciclo celular.
• A expressão tecidual é notável em carcinomas hepatocelulares e linhas celulares de hepatoma, alinhando-se com a sua relevância oncogénica.
• O splicing alternativo de MAD1L1 gera múltiplos isoformas, e mutações estão associadas a defeitos no ponto de verificação relacionados com cancro.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio abrange os aminoácidos 351–718 do MAD1 humano, cobrindo uma grande região C-terminal conservada entre isoformas; este anticorpo policlonal pode, portanto, reconhecer múltiplas variantes.
• Para Western blot, o peso molecular esperado é de aproximadamente 83 kDa; utilize um gel de SDS-PAGE a 10% e garanta uma transferência completa para proteínas de alto peso molecular.
• A reatividade no ELISA deve ser validada nas condições específicas do ensaio; considere titulações em dama para determinar as concentrações ótimas de antigénio de revestimento e anticorpo.
• Como com qualquer reagente policlonal, a consistência entre lotes deve ser confirmada usando um lisado celular padronizado ou proteína recombinante.

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