[Validado pela KD] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-mTOR para WB, IHC-P, ELISA - P42345

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do mTOR

• mTOR (alvo mecanístico da rapamicina), também conhecido como FRAP, FRAP1, FRAP2, RAFT1 e RAPT1, é uma proteína quinase de serina/treonina de 289 kDa que atua como regulador central do metabolismo, crescimento e sobrevivência celular em resposta a hormônios, fatores de crescimento, nutrientes, energia e sinais de estresse. Referências relacionadas: PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926
• O mTOR forma dois complexos multiproteicos distintos, mTORC1 e mTORC2. O mTORC1 é ativado por nutrientes e fatores de crescimento na membrana do lisossomo, onde promove processos anabólicos, como a síntese de proteínas, lipídios e nucleotídeos, enquanto inibe vias catabólicas, como a autofagia. Referências relacionadas: PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:18497260 PMID:32561715
• O mTORC1 fosforila diretamente reguladores essenciais da tradução, incluindo EIF4EBP1 e RPS6KB1, para estimular a tradução de mRNA e a biogênese de ribossomos, promovendo assim o crescimento celular. Referências relacionadas: PMID:24403073 PMID:29236692 PMID:12087098
• O mTORC2 funciona como um complexo insensível a nutrientes que transduz sinais de fatores de crescimento, fosforilando e ativando principalmente quinases AGC, como AKT e PKC, regulando assim a proliferação, a organização do citoesqueleto e o metabolismo. Referências relacionadas: PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:24670654
• Subcelularmente, o mTOR está localizado em várias membranas, incluindo o lisossomo, o retículo endoplasmático, o aparelho de Golgi e a membrana celular, além das mitocôndrias, do citoplasma e do núcleo, refletindo seus diversos papéis na sinalização.
• O mTOR é expresso ubiquamente, com os níveis mais altos nos testículos, e está sujeito a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, ubiquitinação e fosforilação extensiva.
• A desregulação da sinalização do mTOR está associada a doenças como epilepsia e deficiência intelectual, ressaltando seu papel fundamental na homeostase celular e do organismo.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para este anticorpo corresponde aos aminoácidos 1–300 da região N-terminal do mTOR humano, uma região que pode ser adequada para detectar as formas dos complexos mTORC1 e mTORC2. Considere validar o anticorpo nos seus tipos específicos de amostras e aplicações, pois o desempenho pode variar dependendo das condições experimentais.
• Este anticorpo foi validado para Western blot (WB), imuno-histoquímica em parafina (IHC-P) e ELISA. Para WB, espera-se uma banda de alto peso molecular (~289 kDa); assegure condições adequadas de gel e protocolos de transferência para proteínas grandes. Para IHC-P, otimize a recuperação antigênica e a diluição do anticorpo para obter uma coloração específica.
• A reatividade cruzada com o mTOR de camundongo e rato foi confirmada; verifique a reatividade no seu sistema-modelo caso utilize amostras de outras espécies.

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