[Validado por KD] Anticorpo monoclonal de coelho anti-PTBP1 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P26599

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da PTBP1

• A PTBP1, também conhecida como hnRNP I, é uma proteína de ligação ao RNA expressa ubiquamente, envolvida no splicing de pré-mRNA e na regulação do splicing alternativo. Liga-se a trechos de polipirimidina dos íntrons para modular a seleção dos sítios de splicing.
• Desempenha um papel fundamental na regulação de eventos de splicing alternativo específicos de tecidos, como a ativação do salto do éxon do seu próprio pré-mRNA durante a diferenciação das células musculares.
• A PTBP1 regula o splicing de vários transcritos relevantes para doenças: reprime a inclusão do éxon 10 de MAPT/Tau, o que é importante nas tauopatias. Referências relacionadas: PMID:15009664
• Promove o salto do éxon 9 de CFTR ao ligar-se ao elemento regulador rico em polipirimidina (PCE), antagonizando a inclusão do éxon mediada por TIA1. Referências relacionadas: PMID:14966131
• No metabolismo do cancro, a PTBP1 regula o splicing da piruvato-quinase PKM ao reprimir a inclusão do éxon 9, levando à produção da isoforma PKM M2, que apoia a glicólise aeróbica. Referências relacionadas: PMID:20010808
• Durante a infeção por picornavírus, a PTBP1 liga-se ao sítio interno de entrada do ribossoma (IRES) viral e estimula a tradução mediada por IRES, facilitando a síntese de proteínas virais. Referências relacionadas: PMID:21518806
• A localização subcelular é predominantemente nuclear, em concordância com o seu papel no processamento do pré-mRNA.
• A PTBP1 sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e ubiquitinação, que podem regular a sua atividade e as suas interações.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à região N-terminal (aminoácidos 1-100) da PTBP1 humana. Esta região pode ser conservada entre espécies, sustentando a reatividade cruzada observada com camundongo e rato.
• Para Western blotting (WB), o peso molecular esperado é de aproximadamente 60 kDa. Considere utilizar controlos de carregamento adequados e validar a especificidade da banda no seu tecido ou linha celular-alvo.
• Ao realizar imuno-histoquímica em parafina (IHC-P), as condições de recuperação antigénica podem ter de ser otimizadas para o seu tipo específico de amostra. Considere testar diferentes tampões de recuperação.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), a localização nuclear da PTBP1 deve ser confirmada; recomenda-se a contracoloração nuclear para verificar a localização.
• Para imunoprecipitação (IP), a natureza monoclonal deste anticorpo proporciona elevada especificidade. Titule a quantidade de anticorpo para obter uma captura eficiente sem excesso de fundo.
• A aplicação em ELISA pode ser utilizada para deteção quantitativa; certifique-se de que as condições de revestimento e o sistema de deteção são compatíveis com o formato do anticorpo.

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