[Validado por KD] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-SREBF1 para WB, IHC-P, ELISA - Q9WTN3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SREBF1

• O SREBF1 é sintetizado como um precursor incorporado na membrana do retículo endoplasmático. Em condições de baixo esterol, é clivado para libertar um fator de transcrição que entra no núcleo e ativa genes para a biossíntese de colesterol e homeostase lipídica (PubMed:11782483, PubMed:12855691, PubMed:19244231, PubMed:16100574). Referências relacionadas: PMID:11782483 PMID:12855691 PMID:19244231 PMID:16100574
• O SREBF1 ativo liga-se aos motivos SRE-1 e E-box, regulando os promotores dos genes da biossíntese de colesterol e da via do recetor de LDL (PubMed:17290224, PubMed:19244231, PubMed:21459323). A ligação aos motivos E-box é inferida por similaridade. Referências relacionadas: PMID:17290224 PMID:19244231 PMID:21459323
• A isoforma SREBP-1A é expressa em tecidos selecionados, possui alta atividade transcricional e estimula tanto genes lipogénicos como colesterogénicos; também contribui para a imunidade inata em macrófagos (PubMed:8833906, PubMed:12855691, PubMed:21531336, PubMed:9062341). Referências relacionadas: PMID:8833906 PMID:12855691 PMID:21531336 PMID:9062341
• A isoforma SREBP-1C é a forma predominante na maioria dos tecidos, possui atividade mais fraca e controla principalmente genes lipogénicos, impulsionando fortemente a síntese lipídica em células em proliferação (PubMed:8833906, PubMed:9062341, PubMed:12855691, PubMed:21531336). Referências relacionadas: PMID:8833906 PMID:9062341 PMID:12855691 PMID:21531336
• Localização subcelular: O SREBF1 cicla entre a membrana do retículo endoplasmático, a membrana do aparelho de Golgi, vesículas revestidas de COPII e o núcleo de maneira dependente de esteróis.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação e ubiquitinação, que regulam a estabilidade da proteína e a atividade transcricional.
• Especificidade tecidual: O SREBF1 é amplamente expresso. O SREBP-1C predomina no fígado, glândula adrenal, cérebro e tecido adiposo, enquanto o SREBP-1A é seletivamente expresso em tecidos como epitélios intestinais e macrófagos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo sintético da região N-terminal (aminoácidos 1-100) do SREBP1 de camundongo. Esta região é conservada entre o camundongo e o humano, suportando a reatividade cruzada.
• Para o Western blot, o SREBF1 de comprimento total migra a ~120 kDa; considere o uso de percentagens de gel apropriadas e condições de transferência para proteínas de alto peso molecular. A depleção de esteróis pode ser necessária para detetar a forma nuclear processada.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), valide a especificidade do anticorpo usando tecidos de controlo positivos e negativos; tanto tecidos humanos como de camundongo podem ser testados devido à reatividade cruzada.
• Para ELISA, use o peptídeo de imunização como controlo positivo e otimize as condições de revestimento.

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