Anticorpo policlonal de coelho validado por KD contra TFEB para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P19484

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TFEB

• O fator de transcrição EB é um regulador mestre da biogênese lisossomal, da autofagia e de processos metabólicos e imunológicos relacionados.
  Referências relacionadas: PMID:21617040, PMID:22343943, PMID:22576015
• Ele se liga aos motivos de DNA da caixa E e da caixa CLEAR após dimerização com membros da família MiT/TFE, como TFE3 ou MITF.
  Referências relacionadas: PMID:1748288, PMID:19556463, PMID:29146937, PMID:22692423
• A fosforilação do MTOR sensível a nutrientes controla a localização subcelular do TFEB: a fosforilação o retém no citosol, enquanto a desfosforilação promove a importação nuclear.
  Referências relacionadas: PMID:21617040, PMID:22343943, PMID:22576015, PMID:22692423
• O TFEB promove a expressão de genes relacionados à autofagia, regulando positivamente a via autofágica.
  Referências relacionadas: PMID:21617040, PMID:22576015, PMID:23434374
• Durante infecção bacteriana, o itaconato alquila o TFEB, desencadeando a translocação nuclear e a ativação de genes lisossomais para auxiliar na eliminação do patógeno.
  Referências relacionadas: PMID:35662396
• O TFEB se localiza no núcleo, citoplasma e membrana lisossomal, refletindo seus papéis multifacetados na homeostase celular.
• Ele está sujeito a fosforilação, splicing alternativo e ubiquitinação, e desempenha papéis na imunidade adaptativa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 50–173) cobre a região N-terminal comum às isoformas humanas de TFEB, gerando provavelmente anticorpos que reconhecem tanto a forma completa quanto possíveis variantes de splicing. Considere validar os padrões de bandas nos lisados relevantes.
• Para WB, o peso molecular previsto é de 53 kDa, mas a fosforilação pode causar um ligeiro deslocamento para cima. Use fracionamento nuclear/citoplasmático ou amostras de knockout/knockdown de TFEB para confirmar a especificidade.
• Em IF/ICC, o TFEB exibe retenção citoplasmática em condições de abundância de nutrientes e acúmulo nuclear após inanição ou inibição lisossomal. Inclua controles adequados para verificar as alterações de localização subcelular.
• Para IHC-P, pode ser necessário recuperação de antígeno e amplificação do sinal; teste com tecidos positivos conhecidos, como rim ou fígado, onde a expressão de TFEB está documentada.
• Ao usar ELISA, o anticorpo pode ser empregado como reagente de captura ou detecção pareado com proteína TFEB recombinante; otimize as concentrações de revestimento e as condições de bloqueio.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato permite estudos comparativos, mas sempre valide no contexto biológico específico da espécie devido a possíveis variações de epítopo.
• Como anticorpo policlonal, o desempenho pode variar entre lotes; recomenda-se controle de qualidade de rotina usando um padrão de referência para garantir resultados reprodutíveis.

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