[Validado por KD] Anticorpo Monoclonal de Coelho CDK2 para WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P24941

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDK2

• O CDK2 (Ciclina-dependente de quinase 2, p33) é uma serina/treonina proteína quinase essencial para a progressão do ciclo celular, particularmente a transição G1-S e entrada na fase S, onde fosforila RB1 para liberar E2F1 e promover a transcrição.
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• Desencadeia a duplicação do centrossomo ao fosforilar NPM1 e impulsiona a progressão de S para G2 através da ativação da transcrição de genes de histona mediada por ciclina A/CDK2 via fosforilação de NPAT.
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• O CDK2 fosforila BRCA2 para regular o reparo de DNA dependente de recombinação homóloga, com baixa fosforilação durante a recombinação ativa na fase S e aumento da fosforilação em direção à mitose; também fosforila NBN para o reparo de telômeros.
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• A quinase se localiza em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo o núcleo (corpos de Cajal), citoplasma, centrossomos e endossomos, consistente com suas funções pleiotrópicas.

• A atividade do CDK2 é controlada pela ligação da ciclina E/A, fosforilação de ativação pelo complexo CAK CDK7/ciclina H/MAT1 e S-nitrosilação; também serve como substrato para a deubiquitinase USP37 na transição G1-S.
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• Em células-tronco embrionárias, o CDK2 orquestra um equilíbrio entre proliferação, apoptose e reparo de DNA, e sua inativação medeia a inibição do crescimento induzida pela vitamina D.
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Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à região C-terminal (aminoácidos 200-298) do CDK2 humano. Esta região é conservada em camundongo e rato, suportando a reatividade cruzada, mas valide em seu sistema de amostra relevante.
• Para Western blot, o CDK2 endógeno é tipicamente detectado em torno de 30–34 kDa, com bandas de migração mais lenta representando formas fosforiladas. Considere o uso de inibidores de fosfatases em tampões de lise.
• Adequado para imunofluorescência (IF/ICC e IF-P) e imuno-histoquímica (IHC-P). A otimização das condições de fixação (ex: 4% PFA) e permeabilização (ex: 0,1% Triton X-100) é recomendada.
• Para ELISA, aconselha-se o pareamento com um anticorpo de captura adequado e a validação com a proteína CDK2 recombinante.

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