Anticorpo policlonal de coelho DNMT1 validado por KD para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P26358

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da DNMT1

• A DNA (citosina-5)-metiltransferase 1 (DNMT1), também conhecida como CXXC9, MCMT, AIM, HSN1E, ADCADN e m.HsaI, é essencial para a manutenção dos padrões de metilação do DNA durante a divisão celular.
• Metila resíduos CpG, com preferência por DNA hemimetilado, garantindo a herança epigenética durante a replicação do DNA.
  Referências relacionadas:
  PMID:17200670
  PMID:18754681
  PMID:21745816
  PMID:26070743
• Associa-se aos sítios de replicação do DNA na fase S para copiar o padrão de metilação para a fita recém-sintetizada, e também se liga à cromatina durante G2/M para manutenção independente de replicação.
  Referências relacionadas:
  PMID:17200670
  PMID:21745816
• Medeia a repressão transcricional por interação direta com a histona desacetilase 2 (HDAC2).
  Referências relacionadas:
  PMID:10888872
• Coopera com DNMT3B e CTCFL/BORIS para ativar a expressão do gene BAG1 por meio da modulação da dimetilação da histona H3 (H3K4 e H3K9).
  Referências relacionadas:
  PMID:18413740
• Forma um complexo corepressor necessário para a hipermetilação do promotor mediada por KRAS e o silenciamento de genes supressores de tumor em células de câncer colorretal; também mantém a repressão transcricional em células-tronco embrionárias indiferenciadas.
  Referências relacionadas:
  PMID:24623306
• Localiza-se no núcleo e nos cromossomos. É expressa de forma ubíqua, com níveis mais altos em tecidos fetais, coração, rim, placenta e células mononucleares do sangue periférico.
• Contém um domínio de dedo de zinco do tipo CXXC; está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1-124 da DNMT1, uma região N-terminal que pode estar exposta tanto na isoforma de comprimento total quanto em algumas isoformas truncadas. Para aplicações como western blotting (WB), use condições redutoras e marcadores de peso molecular adequados na faixa de 183 kDa.
• Devido ao grande tamanho da DNMT1 (~183 kDa), considere usar géis de poliacrilamida de baixa porcentagem (por exemplo, 6-8%) e tempos de transferência estendidos para garantir uma transferência eficiente.
• Para imunohistoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), otimize as condições de recuperação de antígeno e permeabilização para o seu tipo específico de tecido ou célula.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com amostras humanas, de camundongo e de rato. Valide a especificidade no seu sistema experimental, usando controles positivos e negativos adequados.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de detecção ou captura; o pareamento com outros anticorpos contra DNMT1 pode exigir testes para obter o desempenho ideal.

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