[Validado pelo KD] Anticorpo Policlonal de Coelho TRIM21/SS-A para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P19474

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TRIM21

• O TRIM21/SS-A é uma ligase E3 de ubiquitinação de proteínas com domínios de dedo de zinco do tipo RING, caixa B e enrolado em hélice. Coopera com as enzimas E2 (UBE2D1, UBE2D2, UBE2E1, UBE2E2) para ubiquitinar substratos, incluindo USP4, IKBKB e CDKN1B, e forma complexos semelhantes ao SCF que regulam a progressão do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:16297862, PMID:16316627, PMID:16472766, PMID:16880511, PMID:19675099

• Regula negativamente a imunidade inata através da degradação mediada por ubiquitina do IRF3 e da monoubiquitinação do IKBKB para inibir a sinalização NF-kB. Também promove a ubiquitinação do IRF8 para aumentar a transcrição de genes de citocinas. Referências relacionadas: PMID:18641315, PMID:19675099

• Media a degradação ubiquitina-proteassomal da cadeia pesada de IgG1 através da via ERAD dependente de VCP. Referências relacionadas: PMID:18022694

• Forma uma partícula ribonucleoproteica com moléculas de RNA hY; existem pelo menos duas isoformas com diferenças específicas de tecido. Referências relacionadas: PMID:1985094, PMID:8666824

• Potencializa a atividade de remoção da capa (decapping) de mRNA do DCP2, ligando-se à regulação pós-transcricional. Referências relacionadas: PMID:18361920

• Desempenha um papel fundamental na autofagia, organizando o complexo autofágico (ULK1, BECN1, ATG8) e regulando a estabilidade do FIP200 através da ubiquitinação. Referências relacionadas: PMID:26347139, PMID:36359729

• Respostas antivirais: catalisa a ubiquitinação ligada a Lys-27 do MAVS para aumentar a imunidade inata; media a ubiquitinação ligada a Lys-6 do ISG12a para promover piroptose; e facilita a formação do complexo NMI-IFI35 através da ubiquitinação ligada a Lys-63. Também regula a desmontagem de grânulos de estresse através da ubiquitinação do G3BP1 após choque térmico. Referências relacionadas: PMID:29743353, PMID:36426955, PMID:26342464, PMID:36692217

• A nível subcelular, o TRIM21 localiza-se no citoplasma, núcleo, autofagossomas, corpos P e grânulos de estresse. As isoformas são expressas no coração fetal e adulto e no pulmão fetal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, espera-se uma banda de aproximadamente 54kDa; valide a expressão em linhagens de células humanas, de camundongo ou de rato relevantes. Considere carregar controles positivos apropriados (por exemplo, HEK293, HeLa).
• Imunoprecipitação: Use condições de lise nativa para preservar potenciais interações proteicas; a natureza policlonal pode aumentar a captura de complexos TRIM21.
• Imunofluorescência/ICC e IHC-P: Como o TRIM21 se localiza em múltiplos compartimentos (citoplasma, núcleo, grânulos de estresse), otimize os protocolos de fixação/permeabilização. A recuperação de antígeno pode ser necessária para IHC-P.
• A reatividade cruzada com TRIM21 de camundongo e rato permite o uso translacional em modelos roedores; verifique por alinhamento de sequência e teste na amostra da espécie apropriada.
• ELISA: Este anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; considere o emparelhamento com um anticorpo de detecção monoclonal para o desenvolvimento de ELISA sanduíche.
• Como o imunógeno é um fragmento recombinante (aa 86-334), espera-se que o anticorpo reconheça ambas as isoformas principais. Confirme a especificidade da isoforma no seu sistema experimental.

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