Anticorpo Policloal de Coelho KIAA0391/PRORP para WB e ELISA - O15091

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de KIAA0391/PRORP

• KIAA0391/PRORP, também conhecida como proteína 3 da ribonuclease P mitocondrial (MRPP3), é a subunidade catalítica da RNase P mitocondrial.
• Ela atua no complexo RNase P com TRMT10C/MRPP1 e HSD17B10/MRPP2 para clivar as sequências líderes 5' dos pré-tRNAs mitocondriais. Essa atividade é estritamente dependente das subunidades acessórias. Referências relacionadas: PMID:18984158, PMID:25953853, PMID:34715011
• O processamento adequado do tRNA pela PRORP é essencial para a síntese proteica mitocondrial, e mutações na PRORP causam deficiência combinada da fosforilação oxidativa 54 (COXPD54), uma doença mitocondrial primária.
• A proteína se localiza exclusivamente na matriz mitocondrial, o que é consistente com seu papel na maturação do tRNA mitocondrial.
• PRORP é uma nuclease dependente de metais que requer Mg²⁺, Mn²⁺ ou Zn²⁺ para a catálise, e contém um peptídeo de trânsito mitocondrial para importação.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, e o gene sofre splicing alternativo, sugerindo complexidade regulatória.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 314-583), que fica a jusante do peptídeo de trânsito mitocondrial previsto, portanto o anticorpo provavelmente reconhece a forma madura.
• Para Western blot, o peso molecular previsto da proteína completa é de ~67 kDa; no entanto, a forma processada madura pode ser menor. Valide o tamanho da banda detectada usando lisados mitocondriais apropriados ou controles recombinantes.
• Reatividade cruzada com rato foi observada, indicando que o anticorpo pode reconhecer a PRORP ortóloga em amostras de rato; verifique a homologia de sequência para outras espécies, se necessário.
• Em ELISA, considere usar proteína PRORP recombinante ou extratos mitocondriais como antígeno de revestimento; otimize a concentração de revestimento e a diluição do anticorpo.
• Como a PRORP é uma proteína mitocondrial, a extração eficiente de proteínas das frações mitocondriais pode melhorar a sensibilidade de detecção no WB.

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