[Validado por KO] Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Ajuba para WB, ELISA - Q96IF1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Ajuba

• Ajuba é uma proteína de andaime contendo domínio LIM, codificada pelo gene AJUBA, envolvida na montagem de diversos complexos proteicos que governam o destino celular, a organização do citoesqueleto e a transcrição gênica.
• Contribui para a integridade das junções célula-célula epiteliais, ligando receptores adesivos baseados em caderinas ao citoesqueleto de actina, fortalecendo assim a adesão celular.
• Ajuba atua como um co-repressor transcricional para múltiplos fatores, incluindo SNAI1 e SNAI2/SLUG, para suprimir a expressão de E-caderina, e também serve como um co-repressor dependente de HDAC para um subconjunto de genes alvo do GFI1.
• A proteína se localiza em vários compartimentos subcelulares, incluindo citoplasma, citoesqueleto, membrana celular, junções celulares, núcleo, centrossomo e corpos-P, refletindo seus papéis multifacetados.
• Na regulação mitótica, a Ajuba modula a atividade da quinase AURKA, contribuindo para o comprometimento e progressão mitóticos.
• Atua na sinalização de hipóxia, fazendo a ponte entre prolil hidroxilases e VHL, promovendo assim a degradação eficiente do HIF1A em condições normóxicas.
• Ajuba regula negativamente a via de sinalização Hippo, antagonizando a fosforilação do YAP1, influenciando assim o controle do tamanho do órgão e a tumorigênese.
• A proteína contém domínios LIM que mediam interações proteína-proteína e ligação de zinco, e sofre splicing alternativo e fosforilação, o que pode modular suas diversas atividades celulares.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde a uma região que abrange os aminoácidos 201–290, que fica na porção central da Ajuba; este desenho pode fornecer boa especificidade entre isoformas.
• Para Western blotting, espera-se uma banda próxima a 57 kDa; considere o uso de condições redutoras e valide a detecção com controles apropriados (por exemplo, lisados de células nocaute ou amostras tratadas com siRNA).
• Em aplicações de ELISA, o revestimento com o imunogênio recombinante ou a proteína de comprimento total pode servir como controle positivo; otimize as diluições do anticorpo empiricamente para o seu sistema de ensaio.
• Ao trabalhar entre espécies, observe a reatividade cruzada documentada com humano e rato; verifique o desempenho em outras amostras relevantes, se necessário.
• Dada a participação da Ajuba em múltiplas vias de sinalização, considere estímulos específicos da via (por exemplo, IL-1β, hipóxia) para avaliar mudanças na expressão ou localização proteica dependentes do contexto.

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