[Validado por KO] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-AMPKα1 para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q13131

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AMPKα1

• Codificada pelo gene PRKAA1, a AMPKα1 (subunidade catalítica alfa-1 da proteína quinase ativada por 5'-AMP) também é conhecida como quinase ACACA, quinase HMGCR e quinase de proteína tau PRKAA1.
• Funciona como a subunidade catalítica da AMPK, um sensor energético chave que ativa vias produtoras de energia e inibe processos consumidores de energia em resposta a baixos níveis intracelulares de ATP.
  Referências relacionadas:
  PMID:17307971
  PMID:17712357
  PMID:24563466
• Fosforila diretamente e inativa enzimas metabólicas envolvidas na síntese de lipídios (por exemplo, ACACA, ACACB, HMGCR, LIPE) e regula a síntese de colesterol.
  Referências relacionadas:
  PMID:34077757
• Modula a transcrição e a estrutura da cromatina fosforilando fatores de transcrição e histonas, incluindo a histona H2B em Ser-36, para reprogramar a expressão gênica.
  Referências relacionadas:
  PMID:11518699
  PMID:11554766
  PMID:15866171
• Regula negativamente a sinalização do mTORC1 e estimula a autofagia sob limitação de nutrientes via fosforilação de TSC2, RPTOR, WDR24 e ULK1.
  Referências relacionadas:
  PMID:14651849
  PMID:18439900
  PMID:20160076
  PMID:21205641
  PMID:36732624
  PMID:37079666
• Localiza-se no citoplasma, núcleo e endossomos tardios, consistente com seus múltiplos papéis na sinalização metabólica e no tráfego intracelular.
• Palavras-chave: AMPKα1 é uma quinase de serina/treonina que se liga a ATP e participa da autofagia, metabolismo lipídico, regulação da cromatina, controle do ciclo celular e interações hospedeiro-vírus.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 381-480, uma região próxima ao C-terminal da AMPKα1 humana. Isso pode influenciar a detecção em mutantes de truncamento ou no reconhecimento específico de isoformas; valide no sistema de amostra relevante.
• Para Western blotting (WB), o peso molecular previsto é de ~64 kDa. Use inibidores frescos de protease/fosfatase e considere controles de carga como β-actina.
• Dados de validação por nocaute (KO) suportam a especificidade em amostras humanas; lisados de células KO são recomendados como controles negativos.
• Para imunoprecipitação (IP), o pré-limpamento dos lisados e o uso de uma etapa de centrifugação em baixa velocidade podem reduzir a ligação inespecífica.
• Em imunocitoquímica/imunofluorescência (IF/ICC), a fixação com PFA a 4% e a permeabilização com Triton X-100 a 0,1% são condições iniciais típicas.
• Aplicações de ELISA, IHC-P e IF/ICC podem exigir recuperação de antígeno ou otimização do revestimento proteico; titue o anticorpo primário para obter a melhor relação sinal-ruído.
• É indicada reatividade cruzada com AMPKα1 de camundongo e rato; no entanto, recomenda-se o alinhamento de sequência da região do imunógeno para confirmar a consistência entre as espécies.

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