[Validado por KO] Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ATG4A para WB, ELISA - Q8WYN0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ATG4A

• A ATG4A é uma cisteína protease que desempenha um papel fundamental na autofagia, mediando tanto a ativação proteolítica quanto a deslipidificação das proteínas da família ATG8. Referências relacionadas: PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651
• Ela cliva o aminoácido C-terminal das proteínas ATG8 (por exemplo, MAP1LC3A, GABARAP, GABARAPL2) para expor um resíduo de glicina, permitindo sua conjugação com fosfatidiletanolamina (PE) e inserção na membrana. Referências relacionadas: PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651
• A ATG4A também funciona como uma enzima desubiquitinante-like que remove a ATG8 de conjugados proteicos (ATG8ilação), neutralizando adutos de alto peso molecular. Referências relacionadas: PMID:31315929, PMID:33773106
• Ela exibe atividade de deslipidificação sobre proteínas ATG8 conjugadas com PE, um passo crucial de reciclagem durante a macroautofagia. Referências relacionadas: PMID:29458288, PMID:33909989
• Comparada ao seu homólogo ATG4B, a ATG4A mostra deslipidificação mais forte, mas atividade de processamento proteolítico mais fraca. Referências relacionadas: PMID:29458288
• Além de sua função protease, a ATG4A promove o crescimento do fagóforo durante a mitofagia, regulando o tráfego da ATG9A e mediando contatos RE–fagóforo. Referências relacionadas: PMID:33773106
• A ATG4A localiza-se principalmente no citoplasma.
• Palavras-chave: Splicing alternativo, autofagia, hidrolase, protease, transporte proteico, metabolismo lipídico, via de conjugação Ubl.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 289-398) da ATG4A humana, o que pode ajudar a detectar tanto a forma de comprimento total quanto possíveis variantes de splicing que carecem de porções N-terminais.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 45kDa; garanta a porcentagem de gel apropriada e use lisados de controle positivo de linhagens celulares humanas ou de camundongo.
• O ELISA pode ser realizado usando proteína ou peptídeo de ATG4A recombinante para revestimento; considere a titulação em damas para otimizar as concentrações de anticorpo e antígeno.
• Como um anticorpo policlonal, a variabilidade entre lotes é possível; valide cada novo lote na aplicação pretendida.
• A validação por nocaute indica especificidade; inclua lisado celular KO como controle negativo no WB para confirmar a identidade da banda.

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