[KO Validado] Anticorpo Policlonal Anti-ATG5 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q9H1Y0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ATG5

• ATG5, também conhecido como proteína de autofagia 5, APG5-like ou proteína específica da apoptose, é um componente central da maquinaria de autofagia. É codificado pelo gene ATG5 e amplamente expresso em tecidos humanos.
• O ATG5 é essencial para a formação de vesículas autofágicas. Ele se conjuga com o ATG12 através de um sistema semelhante à ubiquitina envolvendo ATG7 (semelhante a E1) e ATG10 (semelhante a E2), formando o conjugado ATG12-ATG5. Este conjugado atua como uma enzima semelhante a E3, facilitando a lipidação das proteínas da família ATG8 e sua associação com membranas vesiculares.
• A proteína desempenha papéis críticos no controle de qualidade mitocondrial, longevidade celular, desenvolvimento de linfócitos, apresentação de antígenos para MHC II, manutenção da morfologia do axônio, diferenciação de adipócitos e ciliogênese primária, removendo OFD1 dos satélites centriolares.
• O ATG5 está localizado no citoplasma e na membrana da estrutura pré-autofagossomal, consistente com sua função na autofagia.
• O ATG5 está envolvido na apoptose, onde sua expressão é um evento relativamente tardio a jusante da atividade da caspase. Ele media a morte celular autofágica induzida por IFN-gama interagindo com o FADD.
• (Infecção microbiana) O ATG5 pode atuar como um fator pró-viral. Ele regula negativamente a resposta imune antiviral inata, prejudicando a produção de IFN tipo I durante a infecção pelo vírus da estomatite vesicular (VSV) (PubMed:17709747). Além disso, é necessário para a tradução do RNA do vírus da hepatite C (HCV) que entra e para o início da replicação do HCV (PubMed:19666601). Referências relacionadas: PMID:17709747, PMID:19666601
• A proteína sofre acetilação e faz parte de um sistema de conjugação semelhante à ubiquitina (ligação isopeptídica). Está associada a palavras-chave incluindo estrutura 3D, splicing alternativo, variante de doença, interação hospedeiro-vírus e neurodegeneração.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1-275 do ATG5 humano (NP_004840.1), que representa a proteína de comprimento total. Este projeto provavelmente captura a conformação nativa e pode melhorar o reconhecimento do ATG5 endógeno.
• O anticorpo é validado para WB, IF/ICC, IHC-P e ELISA. Para WB, espera-se uma banda em ~32 kDa. Considere o uso de controles de nocaute ATG5 para confirmar a especificidade.
• Dada a alta reatividade cruzada com camundongo e rato, este anticorpo pode ser usado para estudos nesses organismos modelo.
• Para estudos de autofagia, a indução do fluxo autofágico (por exemplo, privação, inibidores de mTOR) pode alterar os níveis do conjugado ATG5; recomenda-se a otimização das condições de tratamento.
• Em experimentos relacionados à apoptose, observe que a expressão de ATG5 aumenta a jusante da atividade da caspase; a análise de série temporal pode ser necessária para capturar as mudanças.
• Para imunoprecipitação e IF/ICC, verifique a compatibilidade do anticorpo com seu tampão e condições de fixação, pois o ATG5 pode estar associado à membrana.

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