[Validado por KO] Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CD133 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - O43490

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Prominin-1

• Prominin-1 (também conhecido como AC133, CD133) é uma glicoproteína transmembrana codificada pelo gene PROM1; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas com distribuições teciduais distintas.
• Está envolvido na diferenciação celular, proliferação e apoptose. Referências relacionadas: PMID:24556617
• A proteína se liga ao colesterol em microdomínios da membrana plasmática e contribui para a organização da membrana plasmática apical em células epiteliais.
• Durante o desenvolvimento retiniano inicial, o prominin-1 atua como um regulador chave da morfogênese dos discos, destacando sua importância na estrutura dos fotorreceptores.
• Em células de neuroblastoma, ele suprime a diferenciação neuronal (crescimento de neuritos) de maneira dependente de RET. Referências relacionadas: PMID:20818439
• A localização subcelular inclui a membrana celular apical, microvilos, cílios, segmentos externos dos fotorreceptores e o compartimento intermediário retículo endoplasmático–Golgi.
• A isoforma 1 é um marcador bem estabelecido para células-tronco e progenitoras hematopoiéticas CD34+, enquanto a isoforma 2 mostra expressão predominante no fígado fetal, músculo esquelético, rim, coração e pâncreas adulto, rim, fígado, pulmão e placenta.
• Modificações pós-traducionais, como acetilação, fosforilação e glicosilação, foram identificadas, o que pode influenciar sua função e peso molecular em ensaios.
• Mutações no PROM1 estão associadas a distrofias retinianas hereditárias, incluindo distrofia cone-bastão, retinite pigmentosa e doença de Stargardt.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 179–433) visa o domínio extracelular, provavelmente benéfico para marcação de superfície em IF/ICC; garanta condições ideais de fixação e permeabilização para estudos de localização celular.
• Para western blot, note que o CD133 é fortemente glicosilado; a massa teórica é de ~97 kDa, mas a banda observada pode migrar para um peso maior. Use condições redutoras/daturantes e valide com um controle positivo (ex: células-tronco) junto com a estratégia de controle negativo validada por KO fornecida.
• Ao realizar imunoprecipitação, são recomendados tampões de lise suaves que preservem a integridade das proteínas de membrana, e a concentração do anticorpo deve ser otimizada para cada sistema experimental.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser avaliado como reagente de captura ou detecção; considere o emparelhamento com um anticorpo de detecção correspondente e valide com a proteína CD133 recombinante.
• Como um policlonal de coelho, a variabilidade lote a lote é possível; é uma boa prática titular cada novo lote para a aplicação pretendida e confirmar a especificidade na matriz de amostra relevante.

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