[KO Validado] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CDKN1A/p21 para WB, IHC-P, ELISA - P38936

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CDKN1A/p21

• CDKN1A/p21, também conhecido como CIP1, WAF1, SDI1, MDA-6 e CAP20, é um inibidor chave de quinase dependente de ciclina envolvido na regulação do ciclo celular.
• Desempenha um papel crítico no controle da progressão do ciclo celular e na parada G2 induzida por dano ao DNA, mediando a inibição da proliferação dependente de p53/TP53 e independente (via CREB3L1). Referências relacionadas: PMID:9106657
• CDKN1A liga-se e inibe a atividade da quinase dependente de ciclina, impedindo a fosforilação de substratos críticos para bloquear a progressão do ciclo celular. Também modula a montagem do complexo ciclina D-CDK4 e sua atividade quinase de maneira dose-dependente.
• A proteína inibe a síntese de DNA competindo com POLD3 pela ligação a PCNA, perturbando a função da DNA polimerase delta. Referências relacionadas: PMID:11595739
• Em queratinócitos, regula negativamente a fosforilação de RB1 mediada por CDK4/6, levando à liberação de E2F1 e transcrição de genes da fase G1/S.
• Localizado tanto no núcleo quanto no citoplasma, o CDKN1A é expresso de forma ubíqua em tecidos adultos, com níveis notavelmente mais baixos no cérebro.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação e ubiquitinação, e apresenta um domínio de dedo de zinco para ligação a metais.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região N-terminal (aa 1-164), que contém os domínios de ligação a CDK e PCNA, tornando este anticorpo um candidato para detectar interações funcionais.
• Para WB, considere que o p21 migra em torno de 18-21 kDa; controles de carga como GAPDH ou β-actina são recomendados.
• Valide a reatividade em amostras de camundongo e rato, pois a reatividade cruzada é relatada; confirme a especificidade da banda na espécie de interesse.
• Para IHC-P, otimize a recuperação antigênica e a diluição do anticorpo; tanto a coloração nuclear quanto a citoplasmática podem ser observadas.
• Aplicações de ELISA podem exigir titulação do anticorpo e do antígeno para alcançar uma relação sinal-ruído ideal.

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