[Validado por KO] Anticorpo monoclonal anti-CDKN1A/p21 PolymAb® de coelho para WB, IF/ICC, ELISA - P38936 / P39689

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de CDKN1A/p21

• CDKN1A/p21, também conhecido como CIP1, WAF1, SDI1, MDA-6 e CAP20, é um inibidor de quinases dependentes de ciclina que desempenha um papel central na regulação do ciclo celular, na senescência e nas respostas a danos no DNA.
• Ele se liga a complexos de quinases dependentes de ciclina (CDK) e os inibe, impedindo a fosforilação de substratos críticos, como RB1, bloqueando assim a progressão do ciclo celular nos pontos de controle G1/S e G2/M.
• Desempenha um papel importante no controle da progressão do ciclo celular e da parada em G2 induzida por danos no DNA, atuando a jusante de p53/TP53 e também em vias independentes de p53 mediadas por CREB3L1 (por similaridade).
  Referências relacionadas:
  PMID:9106657
• Nas forquilhas de replicação, p21 compete com POLD3 pela ligação à PCNA, inibindo diretamente a síntese de DNA pela DNA polimerase delta e contribuindo para as respostas ao estresse de replicação.
  Referências relacionadas:
  PMID:11595739
• Exibe funções duplas: em baixa estequiometria, promove a montagem nuclear e a atividade quinase dos complexos ciclina D-CDK4, enquanto em proporções mais altas inibe o mesmo complexo (por similaridade).
• A localização subcelular abrange tanto o núcleo, onde exerce funções canônicas de inibição de CDK e regulação transcricional, quanto o citoplasma, onde pode influenciar a apoptose e a motilidade.
• É expresso ubiquamente nos tecidos adultos, com níveis notavelmente mais baixos no cérebro, em concordância com seu amplo papel no controle da proliferação.
• Modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, modulam sua estabilidade, localização e interações; ele também contém um domínio dedo de zinco, ressaltando sua natureza multifuncional.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Como anticorpo monoclonal recombinante de coelho (PolymAb®), oferece alta consistência e especificidade entre lotes, sendo adequado para WB, IF/ICC e ELISA.
• Para Western blot, valide utilizando lisados de células com níveis elevados de p21 (por exemplo, culturas tratadas com agentes indutores de danos no DNA ou privadas de soro); células knockout são controles negativos ideais para confirmar a especificidade.
• Em imunocitoquímica/imunofluorescência, otimize a fixação e a permeabilização; espere uma marcação nuclear e citoplasmática e considere a coloração conjunta com marcadores de proliferação.
• Para ELISA, pode-se testar a combinação com um anticorpo de captura ou a detecção direta, garantindo a compatibilidade com o imunógeno recombinante.
• A reatividade com proteínas humanas e de camundongo torna este anticorpo versátil para estudos translacionais; sempre faça a titulação em seu próprio sistema experimental.

CamelBio: sua ponte de fornecimento completa

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