[KO Validado] Anticorpo Policlonal Anti-EBP1/PA2G4 para WB, IHC-P, ELISA - Q9UQ80

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de EBP1/PA2G4

• EBP1/PA2G4, codificado pelo gene PA2G4, também é conhecido como proteína 2G4 associada à proliferação, proteína 1 de ligação a ErbB3 e homólogo da proteína p38-2G4 do ciclo celular. Existe como múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo, sendo as isoformas 1 e 2 as variantes predominantes.
• Funciona na transdução de sinais regulada por ERBB3 e atua como correpressor do receptor de andrógeno (AR). Sua atividade é regulada pelo ligante de ERBB3 neuregulina-1/heregulina. Inibe a transcrição de alguns promotores regulados por E2F1, provavelmente por recrutar atividade de acetilase de histonas.
• A proteína liga-se ao RNA e associa-se aos rRNAs maduros 28S, 18S e 5.8S, a vários precursores de rRNA e ao RNA nucleolar pequeno U3. Está envolvida na regulação das etapas intermediárias e tardias do processamento de rRNA e pode participar da montagem dos ribossomos.
• EBP1/PA2G4 medeia a tradução independente de cap de IRESs virais específicos e regula a proliferação, diferenciação e sobrevivência celular. A isoforma 1 suprime a apoptose, enquanto a isoforma 2 promove a diferenciação celular (por similaridade).
• Subcelularmente, localiza-se no citoplasma, no núcleo e no nucléolo.
• No nível proteico, a isoforma 2 é indetectável em células cancerígenas, enquanto a isoforma 1 é fortemente expressa. Ambas as isoformas são amplamente expressas em tecidos, incluindo coração, cérebro, pulmão, pâncreas, músculo esquelético, rim, placenta e fígado.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e ubiquitinação. É uma fosfoproteína e sofre formação de ligações isopeptídicas e conjugação de Ubl.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1–394 de EBP1/PA2G4 humano, podendo detectar ambas as isoformas se os epítopos forem conservados. Considere validar a especificidade utilizando controles específicos para cada isoforma.
• Para Western blot, espere uma banda próxima ao peso molecular calculado de 44 kDa. Podem ser utilizados lisados de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato; linhagens de células cancerígenas com alta expressão da isoforma 1 podem produzir sinais fortes.
• Na IHC-P, pode ser necessária a otimização da recuperação antigênica. Valide os padrões de coloração em tecidos positivos conhecidos, como cortes tumorais.
• Para aplicações em ELISA, associe a um sistema de detecção apropriado. Os dados de validação por KO indicam que a redução do sinal em células knockout pode servir como um ensaio confirmatório útil.

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