Anticorpo Policlonal Anti-EHMT2 Validado por KO para WB, IP, ELISA - Q96KQ7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da EHMT2

• A EHMT2, também conhecida como G9a, BAT8 ou KMT1C, é uma histona-lisina N-metiltransferase codificada pelo gene EHMT2 (ID do Gene: 10919) e pertence à família de metiltransferases de domínio SET.
• Funciona como uma eucromática H3K9 mono- e dimetiltransferase (H3K9me1/H3K9me2), criando uma marca epigenética repressiva lida por proteínas HP1 para silenciar a transcrição. Referências relacionadas: PMID:11316813 PMID:20084102
• A EHMT2 também monometila a histona H3 na Lis-56 (H3K56me1) durante a fase G1, facilitando a interação com PCNA e a replicação do DNA. Referências relacionadas: PMID:22387026
• Também metila fracamente a H3K27 e modifica a histona H1.4 na Lis-26, expandindo seu repertório de substratos de histonas. Referências relacionadas: PMID:11316813 PMID:19144645
• Além das histonas, a EHMT2 metila substratos não histônicos, incluindo p53 (Lis-373), CDYL, WIZ, DNMT1 e HDAC1, e sofre autometilação. Referências relacionadas: PMID:20118233 PMID:18438403
• A proteína é necessária para a metilação do DNA independentemente de sua atividade de histona metiltransferase.
• A EHMT2 se localiza no núcleo e nos cromossomos, consistente com seu papel na regulação da cromatina.
• É amplamente expressa, com os níveis mais altos no fígado fetal, timo, linfonodo, baço e leucócitos do sangue periférico.
• Estruturalmente, a EHMT2 contém repetições de anquirina, um domínio SET e motivos de dedo de zinco, classificando-a como uma metaloenzima, metiltransferase dependente de S-adenosil-L-metionina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio abrange os aminoácidos 877–1176 (região C-terminal) do EHMT2 humano; considere verificar a reatividade em seu sistema modelo específico, pois os epítopos podem ser conservados entre espécies ou isoformas.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 132 kDa; use um marcador de peso molecular de alta faixa e uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, SDS-PAGE a 8%) para uma resolução ideal.
• Na imunoprecipitação, teste a concentração do anticorpo e as condições de incubação (por exemplo, 1–2 µg por 500 µg de lisado) para otimizar a eficiência de captura e reduzir o fundo.
• Para ELISA, recubra o antígeno a 1–10 µg/mL e faça titulação do anticorpo para determinar a diluição de trabalho ideal; inclua controles negativos apropriados.
• O fornecedor relata validação por nocaute (knockout) para este anticorpo, apoiando sua especificidade para detecção de EHMT2 endógeno; confirme a identidade do alvo por knockdown de siRNA ou linhagens celulares knockout quando necessário.

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