[Validado por KO] Anticorpo Monoclonal Anti-GSDME (Comprimento Total+N terminal) para WB, IP, IHC-P, ELISA - O60443

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Antecedentes Biológicos: Função e Localização da Gasdermina-E

• A Gasdermina-E (GSDME/DFNA5/ICERE-1) é o precursor de uma proteína formadora de poros que, após clivagem pela CASP3 ou granzima B, desencadeia a piroptose, uma forma de morte celular programada distinta da apoptose. Referências relacionadas: PMID:27281216, PMID:28459430, PMID:32188940, PMID:33852854
• O fragmento N-terminal clivado transloca para a membrana plasmática, homooligomeriza-se e forma poros com 10–15 nm de diâmetro, facilitando a libertação de IL-1β e IL-18 e executando a piroptose. Referências relacionadas: PMID:28459430, PMID:32188940, PMID:33852854
• O GSDME medeia a transição da apoptose dependente de caspase-3 para a piroptose em resposta ao TNF, fármacos de quimioterapia e infeções virais, promovendo assim a morte celular inflamatória e a imunidade antitumoral. Referências relacionadas: PMID:27281216, PMID:28459430, PMID:32188940, PMID:28045099
• Como supressor tumoral, o GSDME é clivado pela granzima B entregue pelas células natural killer, induzindo piroptose nas células tumorais alvo e melhorando as respostas imunes antitumorais. Referências relacionadas: PMID:21522185, PMID:31953257, PMID:32188940
• O GSDME também exibe atividade bactericida e pode desempenhar um papel na resposta a danos no DNA mediada por p53/TP53. Referências relacionadas: PMID:27281216, PMID:16897187
• Expresso em múltiplos tecidos, com maior expressão na placenta e na cóclea, consistente com as suas ligações à perda de audição e patologias relacionadas com a gravidez. Referências relacionadas: PMID:9771715
• As modificações pós-traducionais incluem palmitoilção e formação de ligações isopeptídicas; o splicing alternativo gera isoformas com pesos moleculares variáveis.
• A proteína de comprimento total tem um peso molecular previsto de ~55 kDa, enquanto o splicing alternativo e a clivagem produzem fragmentos de ~11 kDa e ~35 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde aos aminoácidos 245–344, que se situam na região N-terminal do GSDME. Esta região é crítica para a formação de poros e é conservada nos fragmentos ativos clivados.
• Ao realizar Western blotting (WB), considere que podem ser observadas múltiplas bandas em torno de 11 kDa, 35 kDa e 55 kDa devido ao splicing alternativo e ao processamento proteolítico. Valide a identificação das bandas com controlos apropriados.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), certifique-se de que as condições de recuperação de antigénio estão otimizadas para a deteção de GSDME localizado na membrana e no citosol em tecidos incluídos em parafina e fixados em formol.
• Nas aplicações de imunoprecipitação (IP) e ELISA, a natureza monoclonal deste anticorpo fornece alta especificidade, mas a reatividade cruzada com outros membros da família das gasderminas deve ser excluída usando controlos relevantes de knockout ou siRNA.

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