[Validado por KO] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Hexoquinase-1 (HK1) para WB, IP, IHC-P, ELISA - P19367

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Hexoquinase-1

• A Hexoquinase-1 (HK1, também conhecida como hexoquinase da forma cerebral, HK I, HK-A) é uma enzima glicolítica de ~102 kDa que catalisa a fosforilação de hexoses, principalmente glicose, para produzir glicose-6-fosfato na etapa inicial da glicólise.
• A HK1 é essencial para o metabolismo da glicose, fosforilando D-glicose, D-glucosamina, D-frutose, D-manose e 2-desoxi-D-glicose, mas não a N-acetil-D-glucosamina (PubMed:1637300, PubMed:25316723, PubMed:27374331). Referências relacionadas: PMID:1637300 PMID:25316723 PMID:27374331
• Além de seu papel metabólico, a HK1 atua como um receptor de reconhecimento de padrão para peptidoglicano bacteriano; a N-acetil-D-glucosamina citosólica do peptidoglicano inibe sua atividade de hexoquinase e desencadeia a dissociação da membrana mitocondrial externa, levando à ativação do inflamassoma NLRP3 e respostas imunes inatas (PubMed:27374331). Referências relacionadas: PMID:27374331
• A HK1 localiza-se predominantemente na membrana mitocondrial externa, com um pool menor no citosol. Essa ancoragem acopla a glicólise à produção de ATP mitocondrial e influencia a sinalização metabólica.
• Existem múltiplas isoformas da HK1 via splicing alternativo: a isoforma 1 é amplamente expressa, a isoforma 2 é específica de eritrócitos e as isoformas 3 e 4 são específicas de testículos (PubMed:10978502). Referências relacionadas: PMID:10978502
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem regular sua atividade e localização subcelular. A HK1 também é uma enzima alostérica e uma quinase de ligação ao ATP.
• Mutações na HK1 estão associadas a doenças como a doença de Charcot-Marie-Tooth, anemia hemolítica hereditária, deficiência intelectual e retinite pigmentosa, destacando sua importância fisiológica crítica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 50–150 da Hexoquinase-1 humana, uma região que pode ser conservada entre as espécies. Usuários que trabalham com amostras de camundongo ou rato devem verificar a reatividade cruzada em seu sistema modelo.
• Para Western blotting, espera-se uma banda próxima a 102 kDa; considere usar condições redutoras e controles de carregamento apropriados para proteínas mitocondriais.
• Em aplicações de imunoprecipitação e imunofluorescência, tenha em mente que a HK1 está localizada principalmente na membrana mitocondrial externa; a permeabilização e o enriquecimento de organelas podem melhorar a detecção.
• Para imuno-histoquímica (IHC), as condições de recuperação de antígeno e os métodos de fixação devem ser otimizados para antígenos mitocondriais. Titule o anticorpo nos tipos de tecido relevantes.
• O anticorpo é adequado para ELISA; ao projetar ensaios quantitativos, inclua padrões apropriados e valide a linearidade e a sensibilidade na matriz da amostra específica.

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