Anticorpo monoclonal anti-Hexoquinase II validado para KO para WB, ELISA - P52789

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Hexoquinase II

• A Hexoquinase-2 (HK II), codificada pelo gene HK2, é uma proteína de 102 kDa com dois domínios de hexoquinase, atuando como uma enzima reguladora essencial no metabolismo da glicose.
• Catalisa a fosforilação da D-glicose em glicose 6-fosfato, a primeira etapa comprometida da glicólise. Referências relacionadas: PMID:23185017, PMID:26985301, PMID:29298880
• Também fosforila outras hexoses, como a D-frutose em frutose 6-fosfato, contribuindo para o metabolismo das hexoses.
• Localiza-se na membrana mitocondrial externa e no citosol; a localização mitocondrial conecta a glicólise à fosforilação oxidativa e impede a apoptose ao inibir a liberação de moléculas apoptogênicas. Referências relacionadas: PMID:18350175
• É a principal isoenzima da hexoquinase em tecidos responsivos à insulina, como o músculo esquelético, conectando a detecção de energia à utilização da glicose.
• Contém sítios alostéricos para a inibição por retroalimentação pela glicose 6-fosfato e domínios de ligação ao ATP (palavras-chave do UniProt: Enzima alostérica, Ligação ao ATP, Quinase, Transferase).
• Está sujeita à acetilação (palavra-chave do UniProt: Acetilação) e a outras modificações pós-traducionais que podem regular sua atividade e localização.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos 120 aminoácidos N-terminais da Hexoquinase II humana; essa região pode conferir alta especificidade para a proteína de comprimento total.
• Para WB, considere preparar frações mitocondriais ou lisados de células inteiras de tecidos responsivos à insulina (por exemplo, músculo esquelético) para enriquecer a Hexoquinase II.
• Os protocolos de ELISA podem exigir a otimização do antígeno de revestimento e das condições de detecção.
• Foi relatada reatividade cruzada com camundongo e rato; valide a detecção em linhagens celulares ou tecidos relevantes.
• O peso molecular previsto é de 102 kDa; confirme o tamanho da banda usando marcadores de peso molecular apropriados.

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