[KO Validado] Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Hsp90β para WB, IF/ICC, ELISA - P08238

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Hsp90β

• A HSP90β (HSP90AB1) é uma chaperona molecular que promove a maturação, manutenção estrutural e regulação adequada de proteínas cliente envolvidas no controle do ciclo celular e transdução de sinal. Passa por um ciclo funcional dependente de ATPase, interagindo com vários co-chaperonas para modular o reconhecimento do substrato e a atividade de chaperona. Referências relacionadas: PMID:16478993 PMID:19696785 PMID:26991466 PMID:27295069

• Além da atividade de chaperona, a HSP90β regula a transcrição alterando os níveis de estado estacionário dos fatores de transcrição, modulando modificadores epigenéticos como histona desacetilases, e removendo histonas das regiões promotoras para ativar a expressão gênica. Referências relacionadas: PMID:25973397

• A HSP90β antagoniza a inibição da sinalização de TGF-beta mediada por STUB1, prevenindo a ubiquitinação e degradação de SMAD3 dependente de STUB1. Referências relacionadas: PMID:24613385

• Promove a diferenciação celular ao chaperonar a BIRC2, protegendo-a da auto-ubiquitinação e degradação proteassomal. Referências relacionadas: PMID:18239673

• Sob choque térmico, a HSP90β chaperona tanto JAK2 quanto PRKCE, levando à fosforilação e ativação de STAT1 e, por sua vez, ativa sua própria transcrição. Referências relacionadas: PMID:20353823

• Envolvida na translocação de cargas sem sinal líder (ex.: interleucina 1/IL-1) para o compartimento intermediário ER-Golgi (ERGIC) via o receptor de carga TMED10. Referências relacionadas: PMID:32272059

• Localiza-se predominantemente no citoplasma, mas também pode ser encontrada em melanossomos, núcleo, secretada e associada a membranas celulares e partículas axonemais de dineína. Sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação, metilação, S-nitrosilação e ubiquitinação.

• (Infecção microbiana) Liga-se à NadA de N.meningitidis, estimulando monócitos, e parece interferir com a invasão mediada por NadA de células humanas. Referências relacionadas: PMID:21949862

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, a banda esperada está em ~83 kDa. Use SDS-PAGE padrão em condições redutoras e considere otimizar o bloqueio e a diluição do anticorpo para o seu tipo de amostra. Valide a especificidade usando linhagens celulares de nocaute de Hsp90β, se disponíveis.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), teste vários protocolos de fixação (ex.: PFA 4%) e permeabilização (ex.: Triton X-100 0,1%), pois a HSP90β pode ser citoplasmática, nuclear ou associada à membrana dependendo do contexto celular.
• O imunógeno cobre os aminoácidos 1-300 (região N-terminal) da Hsp90β humana; note que esta região inclui o domínio de ligação ao ATP, que é altamente conservado. A reatividade cruzada com camundongo, rato e macaco é esperada com base nos dados do fornecedor, mas é aconselhável verificar para a sua aplicação específica.
• Para ELISA, considere otimizar o antígeno de revestimento e o sistema de detecção; o anticorpo é policlonal, portanto a consistência de lote para lote deve ser monitorada.

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