[KO Validado] Anticorpo Policlonel de Coelho Anti-IDH1 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - O75874

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IDH1

• IDH1 codifica a isocitrato desidrogenase dependente de NADP citoplasmática (IDH1), também conhecida como IDPc ou oxalossuccinato descarboxilase, que catalisa a descarboxilação oxidativa do isocitrato em α-cetoglutarato com produção concomitante de NADPH (PubMed:10521434, PubMed:19935646).
  Referências relacionadas: PMID:10521434 PMID:19935646
• A enzima requer íons metálicos divalentes como Mg²⁺ ou Mn²⁺ como cofatores e pertence à família das isocitrato/propilmaleato desidrogenases, desempenhando papéis fundamentais no ciclo do ácido tricarboxílico e na homeostase redox celular.
• IDH1 está predominantemente localizado no citoplasma e citosol, e também é encontrado em peroxissomos, onde pode fornecer NADPH para reações peroxissomais como a atividade de fitanoil-CoA dioxigenase.
• Ao produzir NADPH, IDH1 suporta a biossíntese redutiva, incluindo a síntese de lipídios, e ajuda a manter o ambiente redutor celular contra o estresse oxidativo.
• A proteína está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, que podem modular sua atividade enzimática e distribuição subcelular.
• IDH1 pode funcionar como uma cristalina epitelial corneal, contribuindo potencialmente para a manutenção da transparência corneana (Por similaridade).
• O peso molecular calculado do monômero de IDH1 maduro é de aproximadamente 46,7 kDa, consistente com a banda observada em torno de 47 kDa em Western blotting.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende a proteína IDH1 humana de comprimento total (aa 1–414), sugerindo que o anticorpo pode reconhecer tanto conformações nativas quanto desnaturadas. Para Western blotting, uma banda esperada próxima a 47 kDa deve ser observada; valide usando controles positivos e negativos adequados, pois este anticorpo é validado para KO.
• Na imunoprecipitação (IP), use um protocolo padrão com lisados celulares de tecidos ou linhagens celulares que expressam IDH1. Confirme a captura por Western blotting com um anticorpo diferente ou por espectrometria de massa.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), espera-se um padrão de coloração predominantemente citoplasmático com possíveis pontos peroxissomais. Inclua condições adequadas de fixação e permeabilização e verifique a especificidade usando células controle de knockout para IDH1, se disponível.
• Este anticorpo tem reatividade cruzada com IDH1 de camundongo e rato, sendo adequado para estudos em modelos de roedores. Sempre valide os níveis de expressão no tecido ou sistema celular específico que está sendo investigado.
• Para ELISA, considere o pareamento com um anticorpo de detecção compatível ou o uso do anticorpo tanto como captura quanto como detecção em formato sanduíche, garantindo a mínima reatividade cruzada com outras isoformas de isocitrato desidrogenase (ex.: IDH2, IDH3).

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