[Validado por KO] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-IRF3 para WB - Q14653

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IRF3

• O IRF3 é um regulador transcricional chave das respostas imunes dependentes de interferão do tipo I (IFN), desempenhando um papel crítico na defesa imune inata contra vírus de DNA e RNA. Referências relacionadas: PMID:22394562 PMID:24049179 PMID:25636800
• Em células não infectadas, o IRF3 reside no citoplasma em uma forma inativa. Após a infecção viral ou sinalização do receptor tipo Toll (TLR), ele é fosforilado pelas quinases IKBKE e TBK1, desencadeando dimerização e translocação nuclear. Referências relacionadas: PMID:22394562 PMID:25636800 PMID:27302953
• O IRF3 ativado associa-se à proteína de ligação CREB (CREBBP) para formar o complexo fator 1 ativado por dsRNA (DRAF1), que se liga aos elementos de resposta estimulados por interferão (ISRE) e impulsiona a transcrição de IFN do tipo I e genes estimulados por interferão (ISGs). Referências relacionadas: PMID:16154084 PMID:27302953 PMID:33440148
• O IRF3 pode ser recrutado para a mitocôndria via TOMM70:HSP90AA1, formando um complexo de apoptose que induz a morte celular programada em resposta a certas infecções virais. Referências relacionadas: PMID:25609812
• A localização subcelular inclui citoplasma, núcleo e mitocôndria. O IRF3 transita entre os compartimentos dependendo do seu status de ativação.
• Expresso constitutivamente em uma variedade de tecidos, garantindo ampla vigilância antiviral.
• Modificações pós-traducionais, como fosforilação, acetilação e ubiquitinação, regulam a atividade, estabilidade e interação do IRF3 com outras proteínas.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, potencialmente modulando a função do IRF3 em diferentes contextos celulares.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo visa um epítopo dentro dos aminoácidos 50–150 do IRF3 humano; verifique a especificidade usando a linha de produtos validada por KO ou por knockdown/knockout no seu sistema experimental.
• Para Western blot, espere uma banda em aproximadamente 47 kDa. Use controles positivos, como lisatos de células infectadas por vírus ou estimuladas com pol(I:C), para aumentar a detecção do IRF3 endógeno.
• Em aplicações de ELISA, considere testar o anticorpo como reagente de captura ou detecção em combinação com um par de anticorpos IRF3 correspondente, e valide com proteína IRF3 recombinante.
• Como o IRF3 funciona na imunidade inata, ative as vias com ligantes como pol(I:C) ou vírus Sendai para estudar a fosforilação e translocação em modelos humanos ou de camundongo.

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