Anticorpo Policlonal Anti-ITCH Validado por KO para WB, ELISA - Q96J02

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ITCH

• O ITCH é uma ligase de ubiquitina-proteína E3 que aceita ubiquitina das enzimas E2 e a transfere diretamente para substratos, catalisando cadeias de poliubiquitina ligadas a Lys-29, Lys-48 e Lys-63 para regular a estabilidade, tráfego e sinalização das proteínas. Referências relacionadas: PMID:11046148 PMID:14602072 PMID:15051726 PMID:17028573 PMID:18718448 PMID:19131965
• Como componente central de um complexo de edição de ubiquitina com TNFAIP3, TAX1BP1 e RNF11, o ITCH promove a troca de ubiquitina de Lys-63 para Lys-48 no RIPK1, levando à sua degradação proteassomal e terminação da sinalização inflamatória de TNF/NF-κB. Referências relacionadas: PMID:19131965
• O ITCH ubiquitina a quinase imune inata RIPK2 via cadeias ligadas a Lys-63 para modular a sinalização de NOD2 e direciona a proteína antiviral mitocondrial MAVS para degradação mediada por Lys-48, regulando negativamente as respostas antivirais. Referências relacionadas: PMID:19592251 PMID:19881509
• Nas células hematopoiéticas, o ITCH ubiquitina o fator de transcrição NFE2 com ligações Lys-63, controlando o desenvolvimento da linhagem hematopoiética, e impulsiona a ubiquitinação e degradação de JUNB para limitar a produção de citocinas Th2. Referências relacionadas: PMID:18718448 PMID:16387660
• O ITCH regula a classificação endossomal de receptores como FZD4 e CXCR4 através da ubiquitinação de PI4K2A ou dos componentes do ESCRT-0 HGS e STAM, ligando a estimulação por ligantes às vias endocíticas degradativas. Referências relacionadas: PMID:23146885 PMID:14602072
• A ligase promove a apoptose através da ubiquitinação e degradação dos fatores pró-apoptóticos p15 BID e TXNIP (em colaboração com UBR5) e medeia o efeito antiapoptótico da sinalização de EGFR. Referências relacionadas: PMID:20392206 PMID:29378950
• Subcelularmente, o ITCH é encontrado na membrana celular, citoplasma, núcleo e em membranas de endossomo inicial e endossomo, consistente com seus diversos papéis funcionais.
• O ITCH é amplamente expresso em tecidos humanos e é modificado pós-traducionalmente por acetilação e fosforilação, o que pode regular sua atividade e interações.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1–155 do ITCH humano (NP_001244066.1). Esta região N-terminal pode permitir a detecção do ITCH de comprimento total e variantes de splicing potencialmente contendo a região N-terminal, mas recomenda-se a verificação experimental no sistema de amostra relevante.
• Para Western blotting, espera-se uma banda próxima ao peso molecular previsto de 103 kDa. Use controles apropriados (por exemplo, lisados de knockout de ITCH ou siRNA) para confirmar a especificidade, especialmente dado o papel do ITCH como uma proteína grande e multidomínio.
• A reatividade cruzada é indicada para amostras humanas, de camundongo e de rato. Valide o anticorpo em sua espécie e contexto de tecido específicos, pois os níveis de expressão e modificações pós-traducionais podem afetar o reconhecimento.
• O anticorpo é adequado para ELISA; otimize as condições de captura/detecção usando a proteína ITCH recombinante ou lisados celulares, e combine com um sistema de detecção compatível.

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