[Validado por KO] Anticorpo monoclonal de coelho Anti-KEAP1 (INrf2/KLHL19) - Q14145

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da KEAP1

• KEAP1 (proteína 1 associada a ECH semelhante a Kelch), também conhecida como INrf2 ou KLHL19, é um adaptador específico de substrato para o complexo E3 ubiquitina ligase BCR (BTB-CUL3-RBX1).
• Ela regula a resposta ao estresse oxidativo direcionando o fator de transcrição NFE2L2/NRF2 para ubiquitinação e degradação proteassômica em condições normais. Referências relacionadas: PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695
• Estresse oxidativo ou eletrofílico desencadeia a modificação covalente de resíduos de cisteína reativos na KEAP1, inativando a ligase e permitindo que NRF2 se acumule e ative genes citoprotetores. Referências relacionadas: PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• A KEAP1 também medeia a ubiquitinação de substratos como SQSTM1/p62, BPTF e PGAM5, e está envolvida em vias de autofagia seletiva. Referências relacionadas: PMID:15379550 PMID:17046835 PMID:20452972 PMID:28380357
• Localiza-se tanto no citoplasma quanto no núcleo.
• É amplamente expressa, com níveis mais altos no músculo esquelético.
• Contém repetições Kelch e um domínio BTB; classificada nas vias de interação hospedeiro-vírus, S-nitrosilação e conjugação de Ubl.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 525-624) da KEAP1 humana, que inclui domínios de repetição Kelch críticos para a ligação do substrato. Esta região é bem conservada, o que suporta a reatividade cruzada com camundongo e rato.
• Para Western blotting, é esperada uma banda em torno de 70 kDa. Considere que modificações pós-traducionais (por exemplo, ubiquitinação) ou modificações oxidativas podem alterar ligeiramente a migração.
• Para IF/ICC, pode ser observada coloração tanto citoplasmática quanto nuclear dependendo das condições de estresse celular.
• O anticorpo foi validado por KO, confirmando sua especificidade; no entanto, sempre valide em seu sistema de amostra específico e inclua controles adequados.
• Para ELISA, a ligação direta ao peptídeo imunogênico deve ser confirmada; o pareamento com um anticorpo de captura pode exigir otimização.

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