[KO Validado] Anticorpo Monoclonal Anti-Ki67 para WB, IF/ICC, IHC-P, mIHC, ELISA - P46013

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Ki67

• Ki-67, codificado pelo gene MKI67, também é conhecido como KIA, MIB-1 e PPP1R105. É uma grande proteína nuclear rica em prolina (~359 kDa) que serve como um marcador universal de proliferação.
• Necessário para manter os cromossomos mitóticos individuais dispersos no citoplasma após a desmontagem do envelope nuclear; atua tanto como um repelente de cromossomos durante a mitose inicial quanto como um atrativo de cromossomos durante a mitose tardia. Referências relacionadas: PMID:27362226 PMID:32879492 PMID:35513709
• Durante a mitose inicial, relocaliza-se para a superfície do cromossomo e forma estruturas estendidas semelhantes a pincéis que criam uma barreira estérica e de carga eletrostática, funcionando como um surfactante para prevenir a agregação cromossômica e permitir motilidade independente. Referências relacionadas: PMID:27362226
• Durante a anáfase, os pincéis colapsam e o Ki-67 muda para um atrativo de cromossomos: a desfosforilação expõe um trecho básico, impulsionando a separação de fases líquido-líquido dependente de RNA para agrupar cromossomos e excluir partículas grandes do núcleo nascente. Referências relacionadas: PMID:32879492 PMID:39153474 PMID:28935370
• Liga-se ao DNA com preferência por sequências superenroladas e ricas em AT, potencialmente contribuindo para a organização da cromatina. Referências relacionadas: PMID:10878551 PMID:24867636
• Localiza-se em cromossomos, núcleo e nucléolo durante o ciclo celular.
• A proteína sofre acetilação, fosforilação e ubiquitinação, que regulam sua localização dinâmica e função.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para western blotting, Ki-67 é uma proteína de alto peso molecular (~359 kDa); use um gel de baixa porcentagem (ex.: SDS-PAGE a 6%) e tempos de transferência prolongados para garantir detecção eficiente.
• Valide o anticorpo em seu sistema experimental específico, pois a expressão de Ki-67 é estritamente dependente do ciclo celular e pode variar entre tipos celulares e estados de proliferação.
• Para secções de IHC-parafina, métodos padrão de recuperação antigênica (induzida por calor, pH 6 ou 9) são recomendados; espere coloração nuclear ou nucleolar em células proliferativas.
• O imunógeno (aa 1200-1300) mapeia para a região C-terminal do Ki-67 humano; considere o alinhamento de sequências se a reatividade cruzada com outras espécies for pretendida, pois o anticorpo pode reconhecer epítopos conservados.

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