Anticorpo Monoclonal de Camundongo Anti-Lamin A/C Validado por KO para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P02545

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Lamin A/C

• A Lamin A e a Lamin C, principais produtos proteicos do gene LMNA, formam a rede da lâmina nuclear subjacente à membrana nuclear interna, conectando o envoltório nuclear e a cromatina para regular a montagem nuclear, a organização da cromatina e a dinâmica dos telômeros. Referências relacionadas: PMID:10080180 PMID:10580070 PMID:10587585
• A Lamin A/C regula as propriedades mecânicas do núcleo e a rigidez da matriz, influenciando assim a mecanotransdução celular. Referências relacionadas: PMID:23990565 PMID:25127216
• A lâmina nuclear sofre desagregação dependente do ciclo celular na prófase e remontagem na telófase. Referências relacionadas: PMID:2188730 PMID:2344612
• A Lamin A/C atua no reparo do DNA ao estabilizar quebras de dupla fita do DNA e prevenir translocações cromossômicas. Referências relacionadas: PMID:31548606
• Ela é necessária para o desenvolvimento e a manutenção do sistema nervoso periférico, dos músculos esqueléticos, dos ossos e do coração, além de prevenir a infiltração de gordura nos músculos e na medula óssea. Referências relacionadas: PMID:10080180 PMID:10814726 PMID:11799477 PMID:12075506 PMID:15317753 PMID:18611980 PMID:10587585 PMID:10580070 PMID:12927431
• O acúmulo de pré-lamina-A/C nas células musculares lisas vasculares promove a senescência ao interromper a mitose e causar danos ao DNA. Referências relacionadas: PMID:20458013
• A Lamin A/C está localizada principalmente na lâmina nuclear, no nucleoplasma e no envoltório nuclear; seu acúmulo nas células musculares lisas vasculares aumenta com a idade e a doença, correlacionando-se com a senescência celular e o estresse oxidativo.
• Mutações no LMNA causam um espectro de laminopatias, incluindo distrofia muscular de Emery-Dreifuss, cardiomiopatia dilatada, distrofia muscular de cinturas e síndrome de progéria de Hutchinson-Gilford, frequentemente associadas a um processamento pós-traducional aberrante.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Considere usar lisados enriquecidos em núcleo para WB a fim de aumentar a detecção de Lamin A/C; o anticorpo reconhece uma banda de aproximadamente 74 kDa.
• Use linhagens celulares com nocaute de LMNA como controles negativos para confirmar a especificidade do anticorpo.
• Para imunofluorescência, permeabilize as células com Triton X-100 a 0,1% para visualizar a lâmina nuclear e espere uma marcação periférica.
• O imunógeno abrange os aminoácidos 403–572, uma região comum à Lamin A e à Lamin C; portanto, é provável que o anticorpo detecte ambas as isoformas. Verifique isso no seu contexto experimental.
• Realize pré-testes em tecidos/células de camundongo e rato para validar a reatividade cruzada antes de experimentos em larga escala.
• Para IHC-P, otimize a recuperação antigênica (por exemplo, com tampão de citrato) e inclua controles de tecido positivo apropriados (músculo esquelético, pele).
• Para aplicações de ELISA, faça a titulação do anticorpo e otimize as condições de revestimento e detecção.

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